溫陽活血利水方對阿霉素腎病大鼠腎小球足細(xì)胞podocin表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察溫陽活血利水方對阿霉素腎病大鼠腎小球足細(xì)胞的特異蛋白podocin表達(dá)的影響。初步探討溫陽活血利水方對腎病綜合征的治療作用。 方法：SPF級雄性Wistar大鼠50只，體重250±20克，隨機(jī)分為4組。正常組5只、模型組15只、強(qiáng)的松組15只、中藥組15只。除正常組外，其余各組均采用阿霉素(ADR)5.5mg/kg一次性尾靜脈注射，誘導(dǎo)一種類似人類微小病變型腎病綜合征的大鼠腎病模型，正常組尾靜脈一次性注射生理鹽水1毫升

2、。注射ADR一周后開始治療，中藥組每日一次經(jīng)胃灌服溫陽活血利水方3毫升(每毫升含生藥2g)，強(qiáng)的松組按12mg/kg·d，經(jīng)胃灌服強(qiáng)的松懸液3毫升(強(qiáng)的松劑量同前)，正常組和模型組每日灌服3毫升生理鹽水，均持續(xù)4周。觀察實驗大鼠的大便、小便、體重、水腫、舌質(zhì)等一般情況；造模前、造模后第1周末及第5周末分別測大鼠24小時尿蛋白定量；實驗第5周末處死大鼠取材。(1)麻醉后心臟取血5 ml，分離血清，檢測總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)，總膽

3、固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDC—C)的水平。(2)采用免疫熒光染色和RT—PCR半定量法測定各組大鼠腎小球足細(xì)胞中podocin的表達(dá)水平。(3)取腎組織以光鏡檢測組織形態(tài)學(xué)變化；電鏡下檢測超微結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果： (1)一般情況：正常組大鼠毛發(fā)有光澤，活動多，精神狀態(tài)好，食欲佳。其余各組大鼠注射阿霉素4～5天后大鼠開始出現(xiàn)體重下降，反應(yīng)遲鈍，活動減少，弓背蜷縮，聚堆，體毛稀疏，甚至片狀脫落，進(jìn)食

4、及飲水明顯減少，便溏。注射阿霉素6～7天后大鼠開始出現(xiàn)四足水腫，足、尾紅紫，舌質(zhì)紫暗。造模期間有2只大鼠因嚴(yán)重水腫死亡。其中模型組和強(qiáng)的松組各一只。各治療組分別用中藥、強(qiáng)的松治療1周后大鼠反應(yīng)逐漸好轉(zhuǎn)，進(jìn)食及飲水量較前增加，活動增加；其中中藥組尿量明顯增多，體重緩慢回升。強(qiáng)的松組大鼠表現(xiàn)為異常躁動，攻擊性強(qiáng)。 (2)尿液及血液檢測結(jié)果：造模后1周，各造模組大鼠24小時尿蛋白定量與注射前比較均顯著升高。溫陽活血利水方和強(qiáng)的松在治療

5、4周后能顯著降低阿霉素腎病大鼠的尿蛋白水平。而中藥組和強(qiáng)的松組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。阿霉素腎病大鼠存在明顯的低蛋白血癥和高脂血癥，溫陽活血利水方和強(qiáng)的松都能在治療4周后升高阿霉素腎病大鼠的血清蛋白水平。而僅溫陽活血利水方能降低其血清脂質(zhì)水平。 (3)免疫熒光染色及RT—PCR結(jié)果：阿霉素腎病大鼠腎小球足細(xì)胞podocin mRNA和蛋白表達(dá)降低，而溫陽活血利水方和強(qiáng)的松能在一定程度上減輕podocin mRNA和蛋白表達(dá)的下降。