高山紅景天甙對阿霉素腎病大鼠腎小球硬化防治作用的研究.pdf

1、目的：腎小球疾病在發(fā)展至尿毒癥的過程中有一個共同點，即腎小球硬化。腎小球硬化的病理特征是進行性細胞外基質(zhì)(ECM)積聚，其結(jié)果是使腎小球正常結(jié)構(gòu)消失，導致腎單位破壞。 高山紅景天是一種生長在世界高山高緯度地區(qū)的珍貴藥用植物，在我國主要分布在東北的長白山區(qū)。由于其生長環(huán)境極其惡劣，具有很強的生命力和特殊的適應性。研究發(fā)現(xiàn)其具有抗氧化作用、抗肝纖維化作用。最近的研究顯示其具有抗腎纖維化作用，對腎間質(zhì)損傷有保護作用。對于高山紅景天抗腎

2、纖維化減少細胞外基質(zhì)的積聚，防治腎小球硬化，其作用途徑的研究目前未見文獻報道。 本研究通過建立阿霉素腎病大鼠實驗動物模型，從細胞外基質(zhì)降解的環(huán)節(jié)著手，引入東北長白山地區(qū)特有中藥高山紅景天，作用于阿霉素腎病大鼠模型，觀察應用紅景天甙治療和未用紅景天治療的腎炎大鼠模型腎臟組織病理學改變、腎小球細胞外基質(zhì)成分的含量的變化，以及腎組織及血清中PAI-1、TGF-β1、MMP-2、MMP-9含量變化與腎小球硬化纖維化之間的關(guān)系，揭示高山紅

3、景天防治腎小球硬化的機制，揭示其內(nèi)在變化規(guī)律，為臨床應用提供理論依據(jù)。 方法：Wistar雌性大鼠30只，隨機分為三組(每組10只)，分別為正常對照組、腎炎模型組和腎炎模型加用高山紅景天甙干預組。以大劑量阿霉素沖擊誘導大鼠腎炎模型，留取第1周，2周，3周末24小時尿樣及血樣標本，磺基水楊酸比濁法測定尿蛋白含量，全自動生化分析儀檢測血清尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、膽固醇(TC)、甘油三酯(

4、TG)，光鏡觀察組織病理形態(tài)，免疫組化方法檢測細胞外基質(zhì)成分FN、LN的含量，雙抗體夾心ELISA方法檢測血清MMP-2、MMP-9、TGF-β1的含量，發(fā)色底物法檢測腎組織勻漿液PAI-1、MMP-2、MMP-9含量。 結(jié)果：第1周各組大鼠出現(xiàn)不同程度的蛋白尿，但各組間無明顯差異(P＞0.05)，第2周末模型組與對照組比較有顯著性差異(P＜0.01)，高山紅景天甙干預組與模型組之間無明顯差異(P＞0.05)，第3周末模型組均明

5、顯高于對照組(P＜0.01)，高山紅景天甙干預組明顯低于模型組(P＜0.05)，提示高山紅景天甙可減少尿蛋白的丟失。第3周末模型組TP、Alb的含量顯著低于對照組(P＜0.05，P＜0.01)，而TC、TG的含量均顯著高于對照組(P＜0.01)，高山紅景天甙干預組TP、Alb的含量均明顯高于模型組(P＜0.01)，而TC、TG的含量明顯低于模型組(P＜0.05)。第3周末模型組SCr、BUN的含量顯著高于對照組(P＜0.01，P＜0.0

6、5)；高山紅景天甙干預組與模型組比較，兩者的含量明顯下降(P＜0.01)。 光鏡觀察顯示，對照組腎小球及小管間質(zhì)結(jié)構(gòu)基本正常；模型組腎小球腫大，系膜區(qū)呈輕度增寬，系膜細胞增生，系膜基質(zhì)增多。病變腎小球周圍的近曲小管上皮細胞變性腫脹，部分小管腔內(nèi)可見蛋白管型，間質(zhì)有灶狀纖維組織增生；高山紅景天甙干預組腎小球輕度腫脹，系膜區(qū)呈局灶節(jié)段性輕度增寬，系膜細胞及系膜基質(zhì)增生程度較模型組輕，病變腎小球周圍僅有少數(shù)近曲小管上皮細胞變性，間質(zhì)纖

7、維組織增生及炎細胞浸潤少見。 免疫組織化學結(jié)果顯示，正常對照組FN在腎小球中有少量表達，主要分布于系膜區(qū)，基底膜上著色較淺；在腎小管基底膜有極少量沉積。而LN在腎小球中表達明顯，主要分布于基底膜、系膜區(qū)和鮑曼氏囊；在腎小管中有少量表達，分布于基底膜，間質(zhì)中無明顯表達。計算機圖像半定量分析表明，模型組FN、LN在腎小球及小管中分布的范圍和強度明顯增強，其相對含量明顯高于對照組(P＜0.01)；高山紅景天甙干預組與模型組相比，其表達

8、顯著下降(P＜0.01)，提示高山紅景天甙可抑制阿霉素腎病大鼠細胞外基質(zhì)中FN、LN的過度表達。 與對照組比較，大鼠外周血MMP-2、MMP-9水平在模型組均不同程度增加(P＜0.05，P＜0.01)，應用高山紅景天甙干預后，與模型組比較變化不顯著(P＞0.05)。模型組外周血TGF-β1水平明顯高于對照組，高山紅景天甙干預后其水平明顯下降(P＜0.05)；腎組織PAI-1水平，模型組與對照組比較明顯增高(P＜0.05)，高山紅

9、景天甙干預組與模型組比較明顯下降(P＜0.05)。大鼠腎組織MMP-2、MMP-9水平，模型組與對照組比較有不同程度增加，經(jīng)過高山紅景天甙治療后均明顯上調(diào)(P＜0.05)。 結(jié)論：本實驗結(jié)果表明，高山紅景天甙能夠有效地降低阿霉素腎病大鼠尿蛋白，提高血漿蛋白，改善脂質(zhì)代謝；高山紅景天甙能夠抑制FN、LN的表達，抑制阿霉素腎病大鼠ECM的合成，減少ECM在腎小球和腎小管中的積聚，促進腎臟病理損害的修復；高山紅景天甙通過降低外周血TG