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文檔簡介
1、目的:探討Intermedin(IMD)后處理對大鼠腎臟缺血再灌注損傷(IRI)后血管新生的作用及其機(jī)制。
方法:1.實(shí)驗(yàn)分組及模型制作:健康雄性SD大鼠24只隨機(jī)分為四組:假手術(shù)組、IRI組、IMD后處理組和生理鹽水組。大鼠右腎切除一周后左腎制作腎臟IRI模型。各組分別于恢復(fù)血流后的24h留取血液及腎組織標(biāo)本。
2.HE和PAS染色觀察腎組織的病理變化;
3.常規(guī)檢測血清的尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)
2、;
4.CD31免疫組化標(biāo)記微血管密度(MVD)計(jì)數(shù);
5.免疫組化S-P法檢測血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)及血管生成素受體酪氨酸激酶-2(Tie-2)的蛋白表達(dá);
6.實(shí)時熒光定量RT-PCR法檢測VEGF、Tie-2、缺氧誘導(dǎo)因子(HIF-1α)的mRNA表達(dá)。
結(jié)果:1.HE及PAS染色結(jié)果顯示,IRI組和生理鹽水組腎小管及間質(zhì)病理損傷明顯高于假手術(shù)組(均P<0.01);IMD后處理組腎小管
3、及間質(zhì)病理損傷則顯著輕于IRI組及生理鹽水組(均P<0.01)。
2.IRI組、生理鹽水組、IMD后處理組的BUN和Scr水平與假手術(shù)組相比,均明顯升高(均P<0.01);其中IMD后處理組的BUN和Scr水平較IRI組及生理鹽水組顯著降低(均P<0.01)。
3.與假手術(shù)組相比,IRI組及生理鹽水組腎間質(zhì)的MVD增多(均P<0.01);IMD后處理組腎間質(zhì)的MVD較IRI組及生理鹽水組顯著增多(均P<0.01)。<
4、br> 4.免疫組化結(jié)果顯示,IRI組及生理鹽水組VEGF、Tie-2蛋白表達(dá)較假手術(shù)組增強(qiáng);IMD后處理組的VEGF、Tie-2蛋白表達(dá)較IRI組及生理鹽水組顯著增強(qiáng)(均P<0.01)。
5.實(shí)時熒光定量RT-PCR檢測結(jié)果顯示,與假手術(shù)組比較,IRI組及生理鹽水組VEGF、Tie-2、HIF-αmRNA的表達(dá)均有上調(diào)(均P<0.01);IMD后處理組VEGF、Tie-2、HIF-αmRNA表達(dá)較IRI組及生理鹽水組顯著上
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