伏立諾他增強(qiáng)肝癌細(xì)胞對(duì)5-氟尿嘧啶及奧沙利鉑的化療敏感性.pdf

1、第一部分伏立諾他通過(guò)抑制胸苷酸合成酶表達(dá)增強(qiáng)肝癌細(xì)胞對(duì)5-氟尿嘧啶的化療敏感性
　　目的：研究伏立諾他和5-氟尿嘧啶在肝癌細(xì)胞中的聯(lián)合作用，探討兩者聯(lián)用的協(xié)同效應(yīng)。
　　方法：用伏立諾他和（或）5-氟尿嘧啶處理HepG2、SMMC7721及BEL7402細(xì)胞。進(jìn)行細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞周期檢測(cè)、細(xì)胞凋亡檢測(cè)、普通PCR、蛋白免疫印跡、免疫組織化學(xué)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
　　結(jié)果：伏立諾他及5-氟

2、尿嘧啶均能抑制HepG2、SMMC7721及BEL7402細(xì)胞的增殖。在這三種細(xì)胞系中，兩者聯(lián)合作用的聯(lián)合指數(shù)均小于1，減量指數(shù)均大于1，表明兩者具有協(xié)同效應(yīng)。兩者聯(lián)用引起G0/G1期細(xì)胞周期阻滯和ca spase相關(guān)通路的細(xì)胞凋亡。兩者聯(lián)用在體內(nèi)體外均使成瘤能力下降。5-氟尿嘧啶能引起胸苷酸合成酶表達(dá)的上調(diào)，而無(wú)論其存在與否，伏立諾他均能抑制胸苷酸合成酶的表達(dá)。
　　結(jié)論：伏立諾他及5-氟尿嘧啶在肝癌中聯(lián)用具有協(xié)同效應(yīng)。兩者聯(lián)用

3、通過(guò)引起細(xì)胞周期阻滯和凋亡以及抑制胸苷酸合成酶表達(dá)在體內(nèi)體外均抑制細(xì)胞增殖和成瘤能力。這兩者的合用或許能在肝癌治療中起到一定作用。
　　第二部分伏立諾他通過(guò)抑制Notch通路增強(qiáng)肝癌細(xì)胞對(duì)奧沙利鉑的化療敏感性
　　目的：探討伏立諾他和奧沙利鉑在肝癌細(xì)胞中的聯(lián)合作用及兩者聯(lián)用的協(xié)同效應(yīng)。
　　方法：用伏立諾他和（或）奧沙利鉑處理SMMC7721、BEL7402及HepG2細(xì)胞。進(jìn)行細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、軟瓊脂克

4、隆形成實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞周期分析、細(xì)胞凋亡分析、蛋白免疫印跡、動(dòng)物皮下成瘤實(shí)驗(yàn)及免疫組織化學(xué)。
　　結(jié)果：伏立諾他及奧沙利鉑均能抑制SMMC7721、BEL7402及Hep G2細(xì)胞的增殖。兩者聯(lián)合作用后，這三種細(xì)胞系中的聯(lián)合指數(shù)均小于1，而減量指數(shù)均大于1，表明兩者具有協(xié)同效應(yīng)。兩者聯(lián)用引起G2/M期細(xì)胞周期阻滯和caspas e相關(guān)通路的細(xì)胞凋亡。在體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)中，兩者聯(lián)用均抑制成瘤能力。奧沙利鉑激活Notch信號(hào)通路表達(dá)，而無(wú)論其存