奧沙利鉑聯(lián)合五氟尿嘧啶術(shù)前短程沖擊化療對大腸癌組織survivin基因表達的影響.pdf

1、【及目的】
　　大腸癌是最常見的惡性腫瘤之一,對人類生命有極大的危害。近年來,隨著國內(nèi)膳食結(jié)構(gòu)的改變等原因,大腸癌的發(fā)病率和死亡率顯著上升。其發(fā)病率約排在惡性腫瘤的第三位,且具有年輕化方向的趨勢。大約有30％-50％的患者會發(fā)生轉(zhuǎn)移性復(fù)發(fā),并成為導(dǎo)致患者死亡的主要原因。
　　手術(shù)是大腸癌最重要的治療手段,但進展期大腸癌的復(fù)發(fā)率仍然很高。近年來,新輔助化療作為綜合治療的一種方法在大腸癌中的應(yīng)用已得到越來越多的關(guān)注。新輔助化療是

2、指在施行手術(shù)或放療之前應(yīng)用的全身性化療,其目的是:①使原發(fā)腫瘤或轉(zhuǎn)移病灶縮小,降低腫瘤分期,使不能切除的腫瘤變成可以切除,提高根治性手術(shù)的切除率,降低腫瘤復(fù)發(fā)率;②控制術(shù)前存在的微小癌及亞臨床病灶,抑制由于手術(shù)作用引發(fā)的腫瘤增殖刺激,控制醫(yī)源性轉(zhuǎn)移;③在損傷腫瘤病灶的血管供應(yīng)及淋巴管之前進行化療,使化療藥物容易在腫瘤局部達到有效濃度,起到高劑量殺傷作用;④為術(shù)后判定或選擇抗癌藥物提供依據(jù),有助于術(shù)后化療方案的選擇,并可協(xié)助評價預(yù)后,防止

3、遠處轉(zhuǎn)移。盡管目前臨床上缺乏隨機對照研究的資料肯定其療效,但結(jié)直腸癌病人術(shù)前新輔助化療的應(yīng)用已經(jīng)越來越普遍。
　　但是,術(shù)前新輔助化療并非沒有缺點?；熕幬锏亩靖弊饔每赡軙绊憣⒒颊邫C體術(shù)前調(diào)節(jié)到最佳狀況的準(zhǔn)備;大劑量多療程的輔助化療甚至使有些患者由于骨髓抑制不得不延期手術(shù);對化療不敏感的腫瘤患者來說,存在延誤治療、使病期進展的風(fēng)險。Li等在96例直腸癌術(shù)前新輔助化療病人中,進行術(shù)后傷口愈合的系列研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn):新輔助化療組病人切

4、口愈合延緩的發(fā)生率為32.3％,明顯高于對照組的15.8％;術(shù)后切口感染的發(fā)生率化療組病人為21.9％,也明顯高于對照組的12.6％。所以,目前對于術(shù)前新輔助化療的方案及療程尚未有統(tǒng)一的意見。
　　術(shù)前短程化療可以減少大劑量化療對手術(shù)的影響,同時不會延誤有不全性梗阻或緩慢出血的結(jié)直腸腫瘤病人的手術(shù)治療時間,提高手術(shù)安全性。劉偉平等研究報告,術(shù)前短程沖擊化療后行根治性手術(shù)治療,術(shù)后化療組療效明顯高于對照組,并且毒副反應(yīng)少,結(jié)束一個療

5、程的術(shù)前短程沖擊化療后均能行正常手術(shù)。
　　奧沙利鉑作為第三代鉑類藥物,抗癌活性強,與5-Fu有協(xié)同作用,對多種腫瘤有效,毒副作用低,已經(jīng)廣泛的應(yīng)用。近期有學(xué)者研究表明奧沙利鉑化療能夠通過改變 p38有絲分裂原激活蛋白(Mitogen-activating protein,MAP)和蛋白酶體(proteasome)來降低結(jié)腸癌細胞中調(diào)亡抑制基因(survivin)的活性,誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡。
　　Survivin是凋亡抑制蛋白

6、(Inhibitor of apoptosis,IAP)家族的新成員,是目前發(fā)現(xiàn)最強的凋亡抑制因子。Survivin功能復(fù)雜,具有抑制細胞凋亡,促進細胞轉(zhuǎn)化并且參與細胞的有絲分裂、血管的生成和腫瘤細胞耐藥性的產(chǎn)生等作用。Sohn等在HCT116人結(jié)腸癌細胞中發(fā)現(xiàn)奧沙利鉑能有效抑制腫瘤細胞漿中Survivin的表達。
　　本研究通過對大腸癌患者術(shù)前奧沙利鉑聯(lián)合五氟尿嘧啶短程沖擊化療后,對手術(shù)切除的腫瘤組織進行檢測調(diào)亡抑制基因Surv

7、ivin的表達,進一步評估術(shù)前短程輔助化療對大腸癌患者的治療價值。
　　【實驗方法】
　　對99例結(jié)直腸患者隨機分為兩組。實驗組50例,進行術(shù)前奧沙利鉑聯(lián)合五氟尿嘧啶短程沖擊化療,三日后手術(shù)。對照組49例,常規(guī)術(shù)前準(zhǔn)備后手術(shù)。
　　1.觀察和記錄兩組病人的一般資料,包括性別、年齡和體重。入院后、手術(shù)前和手術(shù)后抽外周血檢查全血和肝、腎功能。嚴(yán)密觀察和記錄術(shù)后的不良反應(yīng),進行對比分析。
　　2.免疫組化技術(shù)檢測結(jié)直腸

8、癌腫瘤組織中的survivin的強度。
　　手術(shù)切除的腫瘤組織標(biāo)本根據(jù)制造商的推薦應(yīng)用辣根過氧化物酶技術(shù)(horseradish-peroxidase technique)進行survivin免疫組化染色。
　　3.應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測結(jié)直腸癌腫瘤組織中的survivin mRNA的表達量。
　　應(yīng)用 RT-PCR技術(shù)檢測手術(shù)切除的腫瘤組織標(biāo)本的survivin mRNA的表達量。連續(xù)收集熒光信號,用 Sequen

9、ce Detection SoftwareV1.2分析軟件獲取Ct值。根據(jù)Ct值和標(biāo)準(zhǔn)品濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算擴增效率,計算Survivin mRNA的相對定量數(shù)。
　　4.統(tǒng)計學(xué)分析
　　釆用SARS6.12統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理,所有變量均用x±s描述,組間均數(shù)比較采用成組設(shè)計的t檢驗進行數(shù)據(jù)分析,計數(shù)資料的比較采用x2檢驗。
　　【實驗結(jié)果】
　　一、術(shù)前奧沙利鉑聯(lián)合五氟尿嘧啶短程沖擊化療對手術(shù)的不良影響

10、r>　　實驗組病人術(shù)后的不良反應(yīng),包括腹腔感染、吻合口瘺、腹瀉、腸梗阻、肺部感染、尿路感染、切口感染等發(fā)生率,與對照組相似(P>0.05),均無統(tǒng)計意義,表明術(shù)前奧沙利鉑聯(lián)合五氟尿嘧啶短程沖擊化療是安全的,不會對手術(shù)造成明顯影響。
　　二、應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測結(jié)直腸癌腫瘤組織中的survivin基因表達的強度
　　實驗組和對照組腫瘤標(biāo)本的survivin免疫組化的表達率分別為88.0％和95.90％,在兩組間的差異有顯著性(

11、P<0.05)。在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移病例中,survivin的表達率在新輔助化療實驗組低于手術(shù)對照組,差異有顯著意義(P<0.05)。
　　三、應(yīng)用 RT-PCR技術(shù)檢測結(jié)直腸癌腫瘤組織中的survivin mRNA的表達量
　　實驗組survivin mRNA表達平均水平為18.1356±16.3216,明顯低于照組的平均水平32.3904±18.6915,有顯著差異(P=0.0041)。
　　【結(jié)論】
　　1.術(shù)前