丙戊酸鈉抑制自噬并增強DNA損傷劑的抗骨髓瘤活性.pdf

1、背景：
　　多發(fā)性骨髓瘤（Multiple myeloma，MM），是一種源自漿細胞的惡性增殖性疾病，伴有血清中單克隆免疫球蛋白或輕鏈（M蛋白）過度生成，導致相關器官或組織損傷。盡管近年來蛋白酶體抑制劑、免疫調節(jié)劑等新的靶向治療不斷涌現(xiàn)，使得MM患者的治療緩解率明顯提高，但聯(lián)合化療仍是目前針對MM的主要治療方法。越來越多的相關研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤細胞可通過啟動自噬抵抗化療藥物造成的DNA損傷，是腫瘤細胞耐藥和抵抗化療的重要因素之一。同樣

2、，在MM臨床治療中，細胞耐藥和對治療抵抗而導致的疾病復發(fā)、進展是臨床醫(yī)生尤其關注的問題。因此，調控自噬在MM細胞中的活性，對于改善MM治療效果具有重要的臨床意義。研究發(fā)現(xiàn)，蛋白的乙酰化修飾可有效調控自噬。已知丙戊酸鈉（Valproic acid，VPA）是一種組蛋白去乙酰化酶抑制劑（HDACi），因此，通過觀察VPA對MM細胞自噬的調控作用及其潛在機制，將為臨床上進一步尋找MM的有效治療提供更佳的依據(jù)。
　　目的：
　　本研

3、究探討組蛋白去乙?；敢种苿￢PA作用于人骨髓瘤細胞系所產生的自噬反應及其與DNA損傷藥物阿霉素（Doxorubicin，DOX）及馬法蘭（Melphalan，MEL）的聯(lián)合使用效應，觀察VPA在人多發(fā)性骨髓瘤細胞系中對自噬的作用，以及其是否能在降低DNA損傷藥物用藥劑量的同時提高抗MM活性及相關機制。
　　方法：
　　以人骨髓瘤細胞系RPMI8226、H929為靶細胞；MTT法檢測不同濃度VPA、DOX、MEL單藥處理的細

4、胞生長抑制率，得出不同抑制率時的用藥濃度（IC值）；根據(jù)所得IC值，檢測非毒性抑制劑量VPA（IC5）聯(lián)合不同劑量（IC10、IC20、IC40）DNA損傷藥物作用時細胞生長抑制率；Western blot檢測實驗組分為：VPA單藥組，DOX單藥組，MEL單藥組，非毒性抑制劑量VPA（IC5）聯(lián)合DOX（IC10）或MEL（IC10）組。檢測單用藥及聯(lián)合用藥組處理后細胞內自噬相關蛋白（LC3、ATG5、ATG7）及乙?；M蛋白H4K16

5、ac水平。
　　結果：
　　VPA、DOX、MEL單藥組，隨著用藥濃度的增加，細胞生長抑制率上升。VPA與DOX、MEL共處理后，細胞抑制率較DOX、MEL單藥組顯著增加（P＜0.05）；VPA單藥處理后胞內LC3水平下降，H4K16ac水平上升；DOX、MEL單藥組處理骨髓瘤細胞后，細胞內LC3水平上升，H4K16ac水平下降；聯(lián)合用藥組LC3及H4K16ac蛋白水平介于VPA與DOX或MEL單藥處理組之間。
　　結