系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者激素耐藥機(jī)制及中藥干預(yù)逆轉(zhuǎn)的研究.pdf

1、目的：
　　探討系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者外周血淋巴細(xì)胞激素耐藥以及中藥有效成分葛根素、三七皂苷逆轉(zhuǎn)耐藥作用的機(jī)制；研究能抑制SLE患者外周血淋巴細(xì)胞P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）高表達(dá)的中藥，為臨床提供逆轉(zhuǎn)激素耐藥、提高治療敏感性的新思路和新方法。
　　方法：
　　利用密度梯度離心法分離單個(gè)核細(xì)胞，用貼壁培養(yǎng)去除單核細(xì)胞以純化淋巴細(xì)胞，并懸浮培養(yǎng)；以四唑鹽比色法（MTT）篩選葛根素、三七皂苷(

2、PNS)、異搏定(VER)對(duì)淋巴細(xì)胞的最高非細(xì)胞毒濃度（細(xì)胞存活率﹥90％）作為干預(yù)濃度，并用此法測(cè)定甲基強(qiáng)的松龍（MP）誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞凋亡的最佳濃度；以葛根素、三七皂苷作為逆轉(zhuǎn)激素耐藥的中藥制劑，異搏定作為對(duì)照組，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)分離培養(yǎng)的淋巴細(xì)胞 P-gp及Annexin V表達(dá)以及健康志愿者和SLE患者外周全血淋巴細(xì)胞P-gp表達(dá)；用SLEDAI標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分SLE患者疾病活動(dòng)性，分析P-gp表達(dá)與SLEDAI積分相關(guān)性。
　　結(jié)果：

3、
　　1.SLE患者外周血淋巴細(xì)胞 P-gp表達(dá)顯著高于健康志愿者，并且與疾病活動(dòng)性顯著相關(guān)；
　　2.葛根素（80ug/ml）、三七皂苷（200ug/ml）可顯著下調(diào)SLE患者外周血淋巴細(xì)胞 P-gp的高表達(dá)，作用強(qiáng)于異搏定；
　　3.葛根素、三七皂苷能進(jìn)一步增強(qiáng)甲強(qiáng)龍誘導(dǎo)的SLE患者外周血淋巴細(xì)胞的凋亡；
　　4.在葛根素、三七皂苷干預(yù)前后，激素誘導(dǎo)的SLE患者外周血淋巴細(xì)胞P-gp表達(dá)與Annexin V呈

4、顯著負(fù)相關(guān)，異搏定干預(yù)前后兩者兩者之間未顯示出顯著的相關(guān)意義。
　　結(jié)論：
　　1.P-gp介導(dǎo)的多藥耐藥是SLE患者激素耐藥的重要機(jī)制之一；
　　2.葛根素、三七皂苷可顯著下調(diào)SLE外周血淋巴細(xì)胞P-gp高表達(dá)；
　　3.葛根素、三七皂苷可協(xié)同激素增強(qiáng)誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞凋亡的作用，對(duì)SLE患者外周血淋巴細(xì)胞激素耐藥有顯著逆轉(zhuǎn)作用；
　　4.葛根素、三七皂苷與競(jìng)爭(zhēng)性鈣通道阻滯劑（異搏定）逆轉(zhuǎn)耐藥機(jī)制不同，有待進(jìn)一