黃果西番蓮提物的制備工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究及與紫果西番蓮黃酮成分比較研究.pdf

1、為了綜合開發(fā)黃果西番蓮(Passiflora edulis f.flavicarpa)，基于本項(xiàng)目組在前期工作中對黃果西番蓮莖葉提取物(PEFE)的抗焦慮活性的證實(shí)，本文致力于考察PEFE的提取工藝，制備具有抗焦慮作用的藥用中間體。鑒于黃酮類化合物是黃果西番蓮莖葉中所含的重要神經(jīng)藥理活性物質(zhì)，故選用總黃酮的提取回收率作為優(yōu)化工藝條件的評價(jià)指標(biāo)。本文首先建立了黃果西番蓮莖葉中總黃酮的含量測定方法，接著用正交設(shè)計(jì)考察了提取溶劑、提取方法、提

2、取溶劑用量等因素對黃果西番蓮莖葉總黃酮提取回收率的影響，最后確定PEFE的提取工藝為：以50％乙醇為溶劑，采用三級三次逆流回流提取，材料粉末先用2倍于材料干重的溶劑潤濕，再用10倍于材料干重的溶劑提取，每次回流0.5h。
　　 本文還為根據(jù)本工藝制備的PEFE制定了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。參照《歐洲藥典》5.3版中的西番蓮提取物的定性鑒別方法，建立了PEFE的定性鑒別方法，并將顯色劑改為便宜易得的AlCl3，得到分辨效果與《歐洲藥典》5.3版

3、相似的提取物TLC色譜圖。對PEFE的含量測定項(xiàng)，除了測定總黃酮含量外，還建立了指標(biāo)成分的HPLC含量測定方法，以黃果西番蓮中一種含量較高的神經(jīng)藥理活性成分--異葒草素為指標(biāo)成分，并對該方法進(jìn)行了方法學(xué)考察。結(jié)果表明，用該方法測定PEFE中的異葒草素含量，專屬性強(qiáng)，線性范圍寬，10小時(shí)內(nèi)測定的穩(wěn)定性好，測定結(jié)果準(zhǔn)確度較高。由此，為PEFE的質(zhì)量控制提供了更科學(xué)合理的質(zhì)控指標(biāo)和方法。本文測定了6批PEFE的總黃酮含量，根據(jù)測定結(jié)果，參照《

4、歐洲藥典》5.3版對西番蓮提取物的含量要求，規(guī)定PEFE的總黃酮含量不得低于2％；用本文建立的HPLC定量方法，測定了6批PEFE的異葒草素含量，規(guī)定PEFE的異葒草素含量不得低于0.5％；此外，還考察了6批PEFE的含水量和灼燒殘?jiān)浚?guī)定PEFE的含水量不得高于5％，灼燒殘?jiān)坎坏贸^10％。
　　 基于本項(xiàng)目組對可食用西番蓮P.edulis的兩個(gè)亞型的神經(jīng)藥理活性差異的發(fā)現(xiàn)，即黃果西番蓮的葉具有抗焦慮活性，而紫果西番蓮

5、的葉不具有抗焦慮活性，卻在高劑量時(shí)顯示鎮(zhèn)靜活性，本文采用HPLC法比較研究了這兩個(gè)亞型的黃酮類化合物組成。結(jié)果顯示，不同地區(qū)采集的紫果或黃果西番蓮樣品的液相色譜圖，出峰很一致，差異很小；而這兩個(gè)亞型的液相色譜圖差異很大；且黃果西番蓮提取液的液相色譜圖中16-24min之間出現(xiàn)的峰，在紫果西番蓮的色譜圖中沒有；紫果西番蓮提取液的液相色譜圖中54-90min之間出現(xiàn)的峰，在黃果西番蓮中沒有；并且，從黃果西番蓮中分離得到的六種主要黃酮化合物l