線粒體靶向性肽Ss-31對人眼小梁細胞抗氧化應激的實驗研究.pdf

1、目的:研究線粒體靶向性肽SS-31對過氧化氫(H2O2)處理的人眼小梁細胞(Human Trabecular Meshwork Cells，HTMCs)氧化應激損傷的保護作用及可能的機制，為青光眼的藥物治療及預防提供實驗依據。
　　方法:將永生化的小梁細胞（深圳眼科醫(yī)院劉旭陽教授惠贈）進行培養(yǎng)傳代后隨機分為5組。正常組:正常培養(yǎng)的HTMCs;對照組（H2O2處理組）:正常培養(yǎng)的HTMCs+過氧化氫（100 umol/L，處理24h

2、）;實驗組（SS-31預處理組）:正常培養(yǎng)的HTMCs+SS-31（SS-31濃度分別為10 nM、100 nM、1μM，處理2h）+過氧化氫（100 umol/L，處理24h）。應用MTT法檢測各組細胞的存活率，流式細胞儀檢測各組細胞的凋亡率，采用DCFH-DA探針檢測細胞內的ROS，ELISA檢測細胞色素C(cytochrome C，CytC)的釋放，PT-PCR檢測caspase-3 mRNA的表達水平。
　　結果:1.與對

3、照組相比，各個SS-31預處理組小梁網細胞的凋亡率均降低，細胞內ROS生成減少，CytC釋放均減少，caspase-3 mRNA表達水平均減少，結果有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。2.不同濃度的SS-31組間隨SS-31濃度增加，細胞凋亡率降低，細胞內ROS產生減少，CytC釋放減少，caspase-3 mRNA表達水平降低，各組間差異存在統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。3.與正常組相比，各SS-31組細胞凋亡率、細胞內ROS生成、CytC釋