間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡的免疫調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的：探討體外人間充質(zhì)干細(xì)胞(HMSCs)對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的免疫調(diào)節(jié)作用和小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞(mMSCs)聯(lián)合來氟米特(LEF)對(duì)小鼠T淋巴細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用。 方法：分別從BAIJB/c小鼠骨髓和健康人骨髓中分離培養(yǎng)MSCs。(1)用EZ-SepTMMouse 1X分離異體BALB/c小鼠的脾淋巴細(xì)胞，在ConA誘導(dǎo)的同時(shí)，先經(jīng)LEF處理，洗去LEF后，脾淋巴細(xì)胞再和mMSCs共同培養(yǎng)。分組：A組：脾淋巴細(xì)胞；B組：脾

2、淋巴細(xì)胞+mMSCs；C組：LEF處理的脾淋巴細(xì)胞；D組：LEF處理的脾淋巴細(xì)胞+mMSCs。用MTT比色法檢測各組T淋巴細(xì)胞的增殖情況，流式細(xì)胞術(shù)分析各組T淋巴細(xì)胞的活化及凋亡情況，定量RT-PCR檢測各組T淋巴細(xì)胞的IL-2、IL-10 mRNA水平。(2)在PHA刺激下，SLE患者外周血淋巴細(xì)胞與不同數(shù)量的HMSCs共同培養(yǎng)。檢測各組T淋巴細(xì)胞的增殖、凋亡情況，分析各組T淋巴細(xì)胞的IFN-γ,、IL-10、TGF-β1 mRNA水

3、平。(3)分離SLE患者外周血單核細(xì)胞，在含rhGM-CSF和rhIL-4的培養(yǎng)條件下制備樹突狀細(xì)胞(DC)。分組：HMSCs處理組、HMSCs未處理組。用流式細(xì)胞儀檢測各組DC表面CD86、CD83、CDla和HLA-DR的表達(dá)，MTT法檢測各組DC刺激淋巴細(xì)胞增殖的能力。 結(jié)果：(1)在體外，mMSCs聯(lián)合LEF對(duì)小鼠T淋巴細(xì)胞的增殖、IL-10mRNA的表達(dá)有協(xié)同抑制作用。(2)HMSCs對(duì)由PHA誘導(dǎo)的SLE患者T淋巴細(xì)

4、胞的增殖、凋亡均有抑制作用，且抑制作用與HMSCs呈劑量依賴性。HMSCs能促進(jìn)SLE患者T淋巴細(xì)胞TGF-β1 mRNA的表達(dá)，抑制IL-10、IFN-γ mRNA的表達(dá)。(3)HMSCs可以影響SLE患者單核細(xì)胞來源的DC分化、成熟、具有抑制DC刺激異體淋巴細(xì)胞增殖的能力。 結(jié)論：(1)mMSCs聯(lián)合LEF對(duì)小鼠T淋巴細(xì)胞有一定程度的協(xié)同免疫調(diào)節(jié)作用；(2)}HMSCs可能通過抑制SLE患者T淋巴細(xì)胞增殖、減少T淋巴細(xì)胞凋亡