砂仁、藿香和蒼術(shù)揮發(fā)油的體外促透皮作用研究.pdf

1、砂仁、藿香、蒼術(shù)為常見的芳香化濕藥，揮發(fā)油含量較高；雪上一枝蒿總堿和士的寧為常見的外用鎮(zhèn)痛類生物堿，但外用時皮膚透過率有限而難于發(fā)揮藥效。為提高兩者的生物利用度，本論文將雪上一枝蒿總堿和士的寧作為模型藥，選擇與該兩種生物堿有協(xié)同藥理作用的中藥砂仁、藿香、蒼術(shù)的揮發(fā)油為促滲劑，進(jìn)行體外透皮實(shí)驗(yàn)研究并探討揮發(fā)油的促滲機(jī)制。主要研究內(nèi)容如下:
　　 1.揮發(fā)油的提取及測定。
　　 采用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，并通過GC-MS鑒

2、別其含量較高的前10種成分并測定含量。結(jié)果砂仁揮發(fā)油收率(mug)為3.3％，主要成分為樟腦(51.19％)、乙酸龍腦酯(9.89％)、龍腦(9.13％)；藿香揮發(fā)油收率為1.26％，主要成分為β-廣藿香烯(17.39％)、α-布藜烯(12.41％)、-α廣藿香烯(4.39％)；蒼術(shù)揮發(fā)油收率為0.88％，主要成分為β-桉葉油醇+蒼術(shù)酮(15.80％)、β-芹子烯(12.85％)、α-水芹烯(7.06％)。
　　 2.砂仁、藿香

3、和蒼術(shù)揮發(fā)油對雪上一枝蒿總堿體外促透皮作用。
　　 (1)三種揮發(fā)油對一枝蒿總堿經(jīng)小鼠皮膚的最佳促滲濃度篩選。
　　 采用改良的Franz擴(kuò)散池進(jìn)行體外透皮實(shí)驗(yàn)，以氮酮(Azone)為促滲劑陽性對照，以雪上一枝蒿甲素為測定指標(biāo)，用高效液相色譜法(HPLC)測定其含量。以小鼠皮膚為透皮屏障，考察1％、3％、5％、7％、10％的揮發(fā)油對雪上一枝蒿總堿的促透效果。結(jié)果表明同系列中3％.Azone、7％砂仁油、7％藿香油、10％

4、蒼術(shù)油對雪上一枝蒿總堿的促透效果最好。對雪上一枝蒿總堿(40mg/m1)12h的平均累積滲透量(Q12，μg/cm2)分別為1275.8，1647.3，1311.2，1085.6；12h平均透皮速率常數(shù)(Jss，μg/cm2.h)為109.4，138.4，107.8，92；12h增滲倍數(shù)(Er)分別為1.09，1.38，1.07，0.92。其中7％砂仁油促透作用優(yōu)于3％Azone(P>0.05)。
　　 (2)最佳促滲濃度的三種

5、揮發(fā)油對一枝蒿總堿經(jīng)裸鼠皮膚促透效果的比較。
　　 以裸鼠皮膚為透皮屏障，3％Azone、7％砂仁油、7％藿香油、10％蒼術(shù)油對雪上一枝蒿總堿的Q12為283，359.1，278.8，211.1；12h的Jss為23.8，30.4，24.1，17；12h的Er分別為2.64，3.38，2.68，1.89。與陰性組比較，3％Azone、7％砂仁油、7％藿香油和10％蒼術(shù)油組的Q12(或Jss)明顯提高(P<0.05)，驗(yàn)證了其促滲

6、作用。7％砂仁油促透效果較3％Azone好，7％藿香油組的Q12雖略小于3％Azone，但其Jss較Azone大，說明其作用較Azne迅速。各組模型藥在裸鼠皮膚上的Q12與Jss均遠(yuǎn)小于小鼠皮膚組，但增滲倍數(shù)均大于小鼠皮膚組說明裸鼠和小鼠皮膚間的滲透性存在較大差異。
　　 (3)砂仁揮發(fā)油中主要成分樟腦的促透效果考察。
　　 以裸鼠皮膚為透皮屏障，考察樟腦對雪上一枝蒿總堿的促透效果，并進(jìn)一步探討砂仁揮發(fā)油中促滲的物質(zhì)基礎(chǔ)

7、。結(jié)果表明3％氮酮、7％砂仁油、3.6％樟腦、7％樟腦對雪上一枝蒿總堿的Q12分別為234.2，187.3，94.7，116.2；12h的Jss為19.6，15.3，7.7，9.8；12h的Er分別為3.5，2.73，1.38，1.75。與陰性組比較，3.6％樟腦(P>0.05)、7％(P>0.05)樟腦都有較好的促透效果，但均不如7％砂仁油，說明砂仁油促滲是多種成分協(xié)同作用的結(jié)果。
　　 3.砂仁、藿香和蒼術(shù)揮發(fā)油對士的寧體外

8、促透皮作用。
　　 (1)三種揮發(fā)油對士的寧經(jīng)小鼠皮膚的最佳促滲濃度的篩選。
　　 用紫外分光光度法測定士的寧的含量。以小鼠皮膚為透皮屏障，考察1％、3％、5％、7％、10％的揮發(fā)油對士的寧透皮的影響。結(jié)果表明3％Azone、5％砂仁油、5％藿香油、1％蒼術(shù)油對士的寧的促透效果最好。對士的寧(6.623mg/ml)的Q12分別為2122.2，2148.7，2358，2245；12h的Jss為162.9，152.8，171

9、.9，177.7；Er分別為1.06，1.0，1.12，1.16。三種中藥揮發(fā)油對士的寧均有一定促透效果。
　　 (2)最佳濃度的三種揮發(fā)油對士的寧經(jīng)裸鼠皮膚透皮效果差異的比較。
　　 以裸鼠皮膚為透皮屏障，3％Azone、5％砂仁油、5％藿香油、1％蒼術(shù)油對士的寧的Q12分別為627.8，136.4，243.3，97.9；12h的Jss分別為49.4，11.5，19.6，8.3；Er分別為6.25，1.46，2.48，

10、1.05。與陰性組比較，3％Azone組的Q12(或Jss)(P<0.01)明顯提高，表明有顯著促滲作用。但Azone組的Q12和Jss均大于揮發(fā)油組(P<0.01)。
　　 (3)樟腦的促透效果考察。
　　 以裸鼠皮膚為透皮屏障，3％Azone、5％砂仁油、2.6％樟腦、5％樟腦對士的寧的Q12分別為800.1，485.8，436.2，396.6；12h的Jss為71.9，42，36.7，33.3；Er分別為6.09，

11、3.56，3.11，2.82。與陰性組比較，2.6％樟腦(P>0.05)、5％樟腦(P>0.05)均顯示較好的促透作用且不呈劑量依賴性，但均不如5％砂仁油，說明砂仁油促滲是多種成分協(xié)同作用的結(jié)果。
　　 4.砂仁、樟腦揮發(fā)油促滲機(jī)制的研究。
　　 采用差示掃描量熱法(DSC)與掃描電鏡研究砂仁揮發(fā)油、樟腦的促透機(jī)制。結(jié)果顯示未經(jīng)處理和僅給模型藥的角質(zhì)層有4個峰，而去除類脂質(zhì)后角質(zhì)層的吸熱峰只有T2保留，說明其它3個峰與類

12、脂結(jié)構(gòu)有關(guān)；與去除類脂質(zhì)后角質(zhì)層相比，Azone、砂仁揮發(fā)油、樟腦處理后的裸鼠皮膚角質(zhì)層4個峰仍保留，但除T2外其它3個峰有不同程度的前移。這一結(jié)果證明Azone、砂仁揮發(fā)油、樟腦對裸鼠皮膚的促透機(jī)理可能與瓦解角質(zhì)層的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)有關(guān)。
　　 皮膚表面超微結(jié)構(gòu)的掃描電鏡觀察，結(jié)果顯示Azone、砂仁揮發(fā)油、樟腦處理后的裸鼠皮膚角質(zhì)層細(xì)胞疏松，細(xì)胞間隙增大，毛囊口孔徑加寬，角質(zhì)鱗片脫落等，進(jìn)一步揭示揮發(fā)油類對角質(zhì)層類脂質(zhì)有溶解