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文檔簡介
1、本文闡述了異硫氰酸鹽(ITCs)的來源、種類、理化性質(zhì)、防癌抗癌研究概況以及ITCs的一些其它作用。進行了白芥子揮發(fā)油提取工藝的優(yōu)化,并對其化學(xué)成份進行鑒定;觀察白芥子揮發(fā)油對肝癌H22細(xì)胞以及小鼠肝癌H22移植性腫瘤的抑制作用,并初步探究其作用機制,為白芥子揮發(fā)油的開發(fā)利用提供新的思路。
本文以L9(34)正交設(shè)計試驗優(yōu)化白芥子揮發(fā)油的提取工藝,并通過GC-MS氣質(zhì)聯(lián)用法分析其化學(xué)成份;采用臺盼藍(lán)染色排染法以及MTT法檢
2、測白芥子揮發(fā)油對小鼠肝癌H22細(xì)胞的體外抑制作用,采用DNA瓊脂糖凝膠電泳法以及流式細(xì)胞儀PI單染法檢測白芥子揮發(fā)油對H22細(xì)胞凋亡與細(xì)胞周期的影響;通過建立小鼠肝癌H22腹水瘤模型和實體瘤模型觀察白芥子揮發(fā)油對小鼠肝癌H22的體內(nèi)抑制作用,并通過HE染色法觀察細(xì)胞形態(tài)的變化,檢測胸腺、脾臟指數(shù)探究白芥子揮發(fā)油的毒副作用,并采用丫啶橙染色觀察腫瘤細(xì)胞凋亡的特征,采用免疫組織化學(xué)方法檢測白芥子揮發(fā)油對小鼠肝癌H22實體瘤凋亡基因Bax、B
3、cl-2表達的影響。
結(jié)果表明白芥子揮發(fā)油最佳提取條件為:水解溫度50℃、緩沖液pH值為5.0、抗壞血酸濃度為0.5mmol/L,揮發(fā)油提取率可達0.164%,所提取揮發(fā)油主要成份為異硫氰酸烯丙酯(89.411%);白芥子揮發(fā)油在體外對小鼠肝癌H22細(xì)胞的生長有顯著的抑制作用,其抑制作用可能是通過細(xì)胞凋亡來實現(xiàn);白芥子揮發(fā)油對小鼠肝癌H22腹水型小鼠具有一定的生命延長作用,且對小鼠肝癌H22實體瘤也有著顯著的抑制作用,呈現(xiàn)
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