ALDH1在乳腺癌原發(fā)灶及淋巴結轉移灶中的表達及其與浸潤、轉移關系的研究.pdf

1、背景及目的：
　　乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，嚴重影響了婦女的身心健康甚至危及生命。目前乳腺癌的發(fā)生機制尚未完全闡明，國內外多項研究認為乳腺癌是一種腫瘤干細胞疾病。乳腺癌干細胞(breast cancer stem cells，BCSCs)可能是乳腺癌發(fā)生及治療后復發(fā)和轉移的根源。因此，徹底去除乳腺癌干細胞有可能徹底治愈乳腺癌。
　　乙醛脫氫酶1(aldehyde dehydrogenase1，ALDH1)已經被證實為

2、乳腺癌干細胞的一個可靠的標記物。ALDH1屬于乙醛脫氫酶家族中的一員，其表達與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展、預后和轉移密切相關，且在乳腺癌干細胞表面高表達。ALDH1是一種能氧化細胞內的醛類的解毒酶，在干細胞的分化早期氧化視黃醇而形成視黃酸。越來越多的證據(jù)表明，腫瘤干細胞在粘附、遷移和侵襲能力等方面具有特征性。與分化子代細胞相比，腫瘤干細胞過表達多種侵襲相關的因子，包括CXC趨化因子受體4（CXC chemokine receptor4，CXCR

3、4）、CD44、MMP2等，提示腫瘤干細胞可能在惡性腫瘤的侵襲轉移中扮演重要的角色。
　　MMPs家族是一個高度保守的內源性蛋白水解酶家族，是細胞外基質的主要調節(jié)物質，幾乎能夠降解細胞外基質的所有成分，其中MMP-2是家族中的主要成員之一，主要作用于基底膜上的Ⅳ型膠原，在腫瘤細胞突破基底膜屏障，發(fā)生侵襲轉移的過程中發(fā)揮重要作用。
　　CXCR4屬于G蛋白耦聯(lián)7次跨膜受體，是CXC趨化因子家族成員基質細胞衍生因子1(strom

4、al cell derived factor-1，SDF-1)/CXCL12的受體，與其配體SDF-1構成的SDF-1-CXCR4生物學軸，可能在多種惡性腫瘤細胞移動、浸潤、轉移和增殖中發(fā)揮重要作用。
　　有關聯(lián)合檢測ALDH1、MMP2、CXCR4三者在乳腺癌浸潤性導管癌(invasiveductal carcinoma, IDC)原發(fā)灶及淋巴結轉移灶中的表達及其與乳腺癌浸潤及淋巴結轉移關系的研究，至今尚未見有報道。且對ALDH

5、1的生物學功能研究不多，對其作用機理也知之甚少。為了探討ALDH1標記的乳腺癌干細胞在乳腺癌原發(fā)灶及淋巴結轉移灶中的表達以及與乳腺癌浸潤轉移的關系和可能的機制，本實驗采用免疫組織化學SP法及原位雜交技術分別檢測ALDH1、MMP2、CXCR4蛋白及ALDH1 mRNA在90例乳腺癌原發(fā)灶及相應的60例淋巴結轉移灶中的表達情況，旨在探討三者之間的相互關系及可能的作用機制，為乳腺癌浸潤轉移的治療開辟新的思路。
　　方法：
　　1

6、.采用免疫組化SP法檢測90例IDC原發(fā)灶組織和相應的60例淋巴結轉移灶組織中ALDH1、MMP2、CXCR4蛋白的表達。
　　2.采用原位雜交技術檢測90例IDC原發(fā)灶組織和相應的60例淋巴結轉移灶組織中ALDH1mRNA的表達。
　　3.統(tǒng)計學處理:應用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件，率的比較采用x2檢驗(chi-square)，相關性分析采用Spearman相關分析，檢驗水準α=0.05。
　　結果：
　　1.

7、在90例乳腺IDC原發(fā)灶中，ALDH1蛋白、ALDH1mRNA、MMP2蛋白、CXCR4蛋白的陽性表達率分別為27.8％(25/90)，30％(27/90)，70.0％(63/90)，76.7％(69/90)。在60例原發(fā)灶及相應的淋巴結轉移灶中，ALDH1蛋白(mRNA)的陽性率分別為28.3％(31.7％)、35％(35％)，且在兩個部位的表達相互呈正相關，且ALDH1蛋白及mRNA在原發(fā)灶及相應的淋巴結轉移灶的表達分布特征相似，均

8、為散在或小簇狀分布;MMP2蛋白的陽性率分別為81.7％、75.0％，在兩個部位的表達無相關性;CXCR4蛋白的陽性率分別為85.0％、80.0％，在兩個部位的表達無相關性。
　　2.在90例乳腺IDC原發(fā)灶中，ALDH1蛋白及mRNA的表達均與較高組織學分級，ER陰性表達，PR陰性表達正相關(P＜0.05); MMP2蛋白與CXCR4蛋白的表達均與組織學分級和淋巴結轉移正相關(P＜0.05)。在60例淋巴結轉移灶中，ALDH1蛋

9、白及mRNA的表達均與ER陰性表達，PR陰性表達正相關(P＜0.05);MMP2蛋白與CXCR4蛋白的表達與乳腺IDC的臨床病理特征均無關(P＞0.05)。
　　3.在90例乳腺IDC原發(fā)灶中，ALDH1蛋白和MMP-2蛋白的表達呈正相關(r=0.298，P＜0.05);ALDH1蛋白和CXCR4蛋白的表達呈正相關(r=0.283，P＜0.05);MMP-2蛋白和CXCR4蛋白的表達呈正相關(r=0.556，P＜0.05)，且MM

10、P2與CXCR4蛋白在ALDH1表達陽性組的陽性率顯著高于表達陰性組的陽性率，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。在60例乳腺IDC淋巴結轉移灶中，ALDH1蛋白和MMP-2蛋白的表達呈正相關(r=0.343，P＜0.05); ALDH1蛋白和CXCR4蛋白的表達呈正相關(r=0.280，P＜0.05); MMP-2蛋白和CXCR4蛋白的表達呈正相關(r=0.481，P＜0.05)，且MMP2與CXCR4蛋白在ALDH1表達陽性組的陽性率

11、顯著高于表達陰性組的陽性率，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　4.在90例乳腺IDC原發(fā)灶中，ALDH1與MMP2蛋白共陽性的23例癌組織中，表達ALDH1的乳腺癌細胞同時表達MMP2蛋白的有20例(87.0％);ALDH1與CXCR4蛋白共陽性的24例癌組織中，表達ALDH1的乳腺癌細胞同時表達CXCR4蛋白的有23例(95.8％)。在60例淋巴結轉移灶中，ALDH1與MMP2蛋白共陽性的20例癌組織中，表達ALDH1的乳

12、腺癌細胞同時表達MMP2蛋白的有18例(90％);ALDH1與CXCR4蛋白共陽性的20例癌組織中，表達ALDH1的乳腺癌細胞同時表達CXCR4蛋白的有19例(95％)。
　　結論：
　　1.ALDH1蛋白及mRNA在乳腺IDC原發(fā)灶與轉移灶中均有表達，且主要表達在ER陰性、PR陰性、低分化癌組織中。
　　2.在乳腺IDC中，ALDH1的表達可能促進了腫瘤的浸潤與轉移，其機制可能與ALDH1陽性細胞同時表達MMP2及C