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1、目的：探究β-catenin/Wnt信號轉(zhuǎn)導通路在人骨髓源性間充質(zhì)干細胞增殖中的調(diào)控作用。
方法：首先分離、培養(yǎng)、并鑒定人骨髓間充質(zhì)干細胞，測定其標志物及多向分化潛能。其次應用鋰劑、GSK-3β抑制劑 SB216763、槲皮素(Quercetin)及慢病毒介導的beta-catenin siRNA轉(zhuǎn)染，正負向調(diào)β-catenin/Wnt信號通路活性，采用CCK-8法測定細胞增殖速度。
結(jié)果：采用經(jīng)典方法培養(yǎng)出的人源性
2、間充質(zhì)干細胞，經(jīng)鑒定確認其特異性標記物，如 CD29(95±3.7％)，CD44(91±2.1%)，CD73(98±1.4%)，CD90(98±2.3%)，CD105(76±6.2%)。經(jīng)分化后可誘導為成熟的脂肪細胞、成骨細胞及軟骨細胞，證明其具有多向分化潛能。通過小分子藥物氯化鋰或者SB216763抑制GSK3β蛋白從而激活β-catenin/Wnt信號轉(zhuǎn)導通路可有效促進間充質(zhì)干細胞增殖。該效應呈劑量相關(guān)性，5mM氯化鋰組可提高細胞總
3、數(shù)至對照組的1.4倍，SB216763（50μM）可提高細胞總數(shù)至1.6倍。相反，β-catenin/Wnt信號轉(zhuǎn)導通路小分子抑制劑槲皮素可明顯抑制MSC的增殖，慢病毒介導的β-catenin蛋白干擾也發(fā)揮了相似的效用。
結(jié)論：β-catenin/Wnt信號轉(zhuǎn)導通路在調(diào)控人源性間充質(zhì)干細胞增殖中發(fā)揮了重要的作用。通過小分子藥物調(diào)控β-catenin/Wnt通路可有效調(diào)控MSCs的增殖。該發(fā)現(xiàn)可為β-catenin/Wnt通路相
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