鹽酸克倫特羅時間分辨熒光免疫分析方法的建立.pdf

1、食品安全問題已經(jīng)成為當今世界關(guān)注的焦點問題之一。近年來，鹽酸克倫特羅(CBL)殘留致使食物中毒的報道屢見報端，嚴重危害了人們的健康與生命。時間分辨熒光免疫分析方法(TRFIA)是近十年發(fā)展起來的一種新興的非放射性免疫標記技術(shù)，具有靈敏度高、特異性強、重復性好等優(yōu)點，并且非常適合大規(guī)模樣品的篩選。 本論文旨在開發(fā)具有我國自主知識產(chǎn)權(quán)的高靈敏、快速檢測CBL的TRFIA試劑盒。首先，重氮化的CBL分別與血藍蛋白(KLH)和卵清蛋白(

2、OVA)交聯(lián)，合成免疫抗原CBL-KLH和包被抗原CBL-OVA。免疫原CBL-KLH按免疫程序免疫新西蘭大白兔，產(chǎn)生的抗血清效價高達1：204800。以此抗體為基礎(chǔ)，設(shè)計了間接競爭兩步TRFIA(CBL-TRFIA)方法：固相CBL與游離CBL共同競爭有限的抗CBL抗體，用稀土離子Eu3＋標記的羊抗兔抗體進行示蹤。研制出可方便得應用于各個實驗室中的間接競爭CBL-TRFIA檢測試劑盒。此TRFIA試劑盒靈敏度達到：0.0076μg/L