耐高溫高糖的葡萄糖酸鹽生產(chǎn)菌的基因組改組及發(fā)酵工藝的優(yōu)化.pdf

1、我國(guó)華南地區(qū)地屬亞熱帶，是一個(gè)長(zhǎng)夏無冬的地區(qū)，夏季炎熱的高溫常常導(dǎo)致冷卻能耗的增加，提高生產(chǎn)成本；高濃度的初始糖發(fā)酵，使得菌體因?yàn)槠咸烟堑姆纸獯x，阻遏葡萄糖氧化酶的合成，導(dǎo)致發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)。因此，篩選優(yōu)良的葡萄糖酸鹽生產(chǎn)菌株有著十分重要的意義。 本文以黑曲霉-ZBY 7為出發(fā)菌株，通過基因組改組技術(shù)，獲得一株能夠耐受高初始糖、高溫條件下發(fā)酵良好的菌株。主要結(jié)果如下： 1．從工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖酸鹽的菌株黑曲霉-ZBY7為

2、出發(fā)菌株，通過基因組改組，篩選到一株在40﹪初糖濃度，37℃條件下發(fā)酵良好的菌株，其葡萄糖消耗速率為3.00 mg．h<'-1>．mL<'-1>的融合菌株，命名為A．niger-GS-30。比出發(fā)菌株，A．niger-GS-30發(fā)酵的初始糖濃度提高60﹪，發(fā)酵溫度提高4℃，耗糖速率比出發(fā)菌株提高28.21﹪。 2．利用單次單因子法初步優(yōu)化了培養(yǎng)基，確定了其最佳氮源為尿素，最佳初始PH值為6.5，最佳裝液量為40ml/250ml搖

3、瓶，最佳種齡為20h，最佳接種量為10﹪。 之后，我們利用plackett-bunnan法發(fā)從初始發(fā)酵培養(yǎng)基中篩選出尿素、MgSO<,4>，CaCO<,3>三個(gè)對(duì)發(fā)酵結(jié)果有重要影響的子，并利用中心組合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，確定了適合融合菌株發(fā)酵的最優(yōu)發(fā)酵培養(yǎng)基(每1L自來水中)：葡萄糖400g，尿素0.657 g，KH<,2>PO<,4> 0.20g，MgSO<,4>．7H<,2>O 0.22g，CaCO<,3> 36.50g．。A．nig