葡萄糖氧化酶產(chǎn)生菌分離篩選及發(fā)酵條件優(yōu)化研究.pdf

1、葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase, E.C.1.1.3.4，簡(jiǎn)稱(chēng)GOD)能夠在有氧條件下催化葡萄糖產(chǎn)生葡萄糖酸和過(guò)氧化氫，具有去除葡萄糖、脫氧、殺菌等作用，廣泛應(yīng)用于食品、飼料、醫(yī)藥等行業(yè)。葡萄糖氧化酶分布于動(dòng)物、植物和微生物體內(nèi)，但由于微生物具有生長(zhǎng)繁殖速度快，來(lái)源廣等特點(diǎn)使之成為葡萄糖氧化酶的主要來(lái)源。目前，工業(yè)生產(chǎn)上主要利用黑曲霉或青霉發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖氧化酶。
　　 本研究從土壤中分離純化得到一株葡萄糖氧化酶產(chǎn)生

2、菌，經(jīng)BIOLOG微生物鑒定系統(tǒng)鑒定為黑曲霉(Aspergillus niger)，研究了培養(yǎng)基組成和理化因子對(duì)產(chǎn)生葡萄糖氧化酶酶活力的影響，確定了最佳發(fā)酵條件。通過(guò)研究得到如下結(jié)論：
　　 (1)培養(yǎng)基中主要營(yíng)養(yǎng)物最佳成分分別為葡萄糖、蛋白胨、硝酸鈉。
　　 (2)培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物最佳濃度分別為葡萄糖100g/l，蛋白胨4g/l，硝酸鈉3g/l，磷酸氫二鉀2g/l，硫酸鎂0.7g/l，碳酸鈣3.5g/l，氯化鉀0.5g

3、/l。使用優(yōu)化后的培養(yǎng)基產(chǎn)酶活性為1.17μmol/min，較未優(yōu)化前（0.79μmol/min）有明顯提高。
　　 (3)黑曲霉菌搖床發(fā)酵產(chǎn)葡萄糖氧化酶的最佳時(shí)間為72h、培養(yǎng)基pH為6、培養(yǎng)溫度為28℃、振蕩器轉(zhuǎn)速為200轉(zhuǎn)/分、接種量為10％、菌齡為36h。
　　 (4)黑曲霉發(fā)酵罐發(fā)酵試驗(yàn)的最佳條件為溫度28℃、攪拌器轉(zhuǎn)速為200轉(zhuǎn)/分、pH為6、發(fā)酵時(shí)間48h。
　　 (5)麩皮固態(tài)發(fā)酵發(fā)酵黑曲霉產(chǎn)葡萄