產(chǎn)氨基葡萄糖工程菌的構(gòu)建與發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf

1、氨基葡萄糖(GlcN)又被稱為氨基葡糖或者葡糖胺，它是葡萄糖2號(hào)位 C上羥基被氨基取代后的化合物，在很多領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用，尤其是在醫(yī)藥領(lǐng)域和保健領(lǐng)域。氨基葡萄糖傳統(tǒng)生產(chǎn)方法主要采取酸解幾丁質(zhì)法，受原料限制產(chǎn)量低，污染比較嚴(yán)重，并且不適合個(gè)別過(guò)敏人群。采用微生物發(fā)酵法替代酸解法是目前研究的熱點(diǎn)。
　　本文介紹一種構(gòu)建基因工程菌產(chǎn)氨基葡萄糖的方法，通過(guò)大腸桿菌中產(chǎn)氨基葡萄糖的代謝途徑分析，找到了代謝途徑中的兩個(gè)關(guān)鍵酶氨基葡萄糖合酶和

2、氨基葡萄糖乙酰化酶，通過(guò)將枯草芽孢桿菌中的氨基葡萄糖合成酶基因（Glms）和釀酒酵母中的氨基葡萄糖乙?；颍╣naI）基因，共同導(dǎo)入到大腸桿菌中，讓其在大腸桿菌中的高效表達(dá)生產(chǎn)氨基葡萄糖和乙酰氨基葡萄糖，乙酰氨基葡萄糖經(jīng)過(guò)弱酸處理得到氨基葡萄糖。構(gòu)建好的基因工程菌和原始菌對(duì)比，氨基葡萄糖合成酶蛋白和乙酰化酶蛋白表達(dá)量有了明顯的提高。
　　通過(guò)搖瓶發(fā)酵優(yōu)化，重組菌的胞內(nèi)和胞外氨基葡萄糖在16h時(shí)達(dá)到最高值，分別為0.637g/L和