Hemin誘導腦紅蛋白高表達對脊髓損傷的保護作用.pdf

1、目的:制作大鼠Allen's脊髓損傷(Spinal Cord Injury，SCI)模型，腹腔注射氯化血紅素(Hemin)溶液。分析Hemin干預脊髓損傷后大鼠行為學評分的變化和不同分組實驗后一定時間點評分的差異，Hemin處理后大鼠脊髓內(nèi)腦紅蛋白(Neuroglobin，Ngb)表達空間和數(shù)量的規(guī)律，以及Hemin處理引起的脊髓Ngb高表達對于脊髓損傷后脊髓組織結(jié)構、細胞水平、病理進程影響，試為臨床采用Hemin干預脊髓損傷提供可靠的

2、實驗室理論基礎。
　　方法:健康雄性SD大鼠90只，體重180g-200g，由軍事醫(yī)學科學院提供，隨機分為三組:對照組（假手術組）、手術組（僅造模）、Hemin處理組（造模后腹腔注射Hemin溶液）。假手術組僅進行椎板卸下后還納，不進行脊髓打擊，造模后腹腔注射相同量生理鹽水;手術組采用Allen's法制作大鼠損傷模型，造模后腹腔注射相同量生理鹽水;Hemin處理組進行造模和相同量的Hemin溶液腹腔注射。采用大鼠后肢功能BBB評分

3、、蘇木素伊紅染色、尼氏染色、免疫組化等方法評價各組大鼠實驗后1d、3d、7d、14d、28d、56d時大鼠運動功能差異、脊髓結(jié)構改變、Ngb表達含量和分布的差異等。實驗相關結(jié)果數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。
　　結(jié)果:(1) BBB評分結(jié)果:對照組＞Hemin處理組＞手術組。(2) HE染色結(jié)果:對照組脊髓組織完整，無明顯的紅細胞積聚及空隙，無炎性細胞浸潤，神經(jīng)細胞未出現(xiàn)病理改變;手術組脊髓具有明顯的紅細胞積聚及空隙，炎性細胞浸潤明顯，噬神

4、經(jīng)現(xiàn)象等病理改變嚴重;Hemin處理組損傷重于對照組，但明顯輕于手術組，有少量出血和空腔，神經(jīng)組織炎性細胞浸潤現(xiàn)象較少，神經(jīng)細胞水腫變性較少。(3)尼氏染色結(jié)果:對照組神經(jīng)元形態(tài)正常，尼氏體圍繞胞核呈顆粒狀，顏色較深切且分布較多，由內(nèi)向外顏色逐漸遞減;Hemin處理組染色結(jié)果中水腫及顏色變淺、數(shù)量減少重于對照組但輕于手術組;手術組神經(jīng)元病理變化最重，除上述情況外，更有尼氏體溶解的現(xiàn)象。(4)免疫組化結(jié)果:Hemin處理組陽性細胞最多，手

5、術組次之，假手術組最少。
　　結(jié)論:本實驗通過采用Hemin腹腔注射干預脊髓損傷Allen's造模后的SD大鼠，對脊髓損傷引起脊髓組織Ngb高表達及Hemin誘導脊髓組織Ngb高表達的作用進行了驗證。對Hemin誘導的脊髓組織Ngb高表達在脊髓損傷過程中的作用進行了研究和探討。本實驗的結(jié)果提示利用Hemin誘導脊髓Ngb高表達可以在提高大鼠對脊髓損傷的抗性。Ngb的神經(jīng)保護作用涉及多途徑、多環(huán)節(jié)，利用Hemin可以增強內(nèi)源性Ngb