預(yù)熱誘導(dǎo)HSP70表達對小鼠胚胎熱損傷的保護作用.pdf

1、選擇昆明白雌性小鼠作為試驗動物，以37℃2h條件下正常體外培養(yǎng)為對照，將體外培養(yǎng)至擴張囊胚（hCG后113h）的小鼠胚胎分別施以38℃2h、39℃2h和40℃2h的預(yù)熱應(yīng)激處理，然后分別將預(yù)熱胚胎和對照組胚胎置于42℃高溫下處理3h，以觀察熱休克蛋白70(HSP70)表達對高溫所致胚胎損傷的影響.用Westernblot技術(shù)檢測小鼠囊胚內(nèi)HSP70的表達;臺盼蘭染色后體視顯微鏡觀察熱應(yīng)激后囊胚的死亡與畸形，計算存活率。以研究小鼠囊胚的熱

2、敏性、熱應(yīng)激對小鼠囊胚HSP70表達的影響以及囊胚熱耐受的獲得與HSP70表達之間的關(guān)系，判斷HSP70增量表達對胚胎抵抗高溫損傷有無保護作用。試驗結(jié)果如下:
　　 1.熱應(yīng)激對囊胚存活率的影響
　　 38℃2h、39℃2h和40℃2h不同溫度熱應(yīng)激處理各組囊胚存活率（分別為83.01％、69.11％和63.51％）均低于對照組(94.01％)。39℃2h和40℃2h與對照組相比差異極顯著(P＜0.01)，38℃2h與對

3、照組之間差異顯著(P＜0.05);囊胚存活率在39℃2h和40℃2h組間無顯著差異(P＞0.05)。
　　 2.誘導(dǎo)熱應(yīng)激對囊胚存活率的影響
　　 在不同溫度誘導(dǎo)熱應(yīng)激組中，先經(jīng)38℃2h、39℃2h和40℃2h預(yù)熱應(yīng)激處理，再經(jīng)42℃高溫處理3h后囊胚的存活率（25.16％、36.37％和22.81％）均高于直接42℃3h熱應(yīng)激組(13.07％)。其中39℃熱誘導(dǎo)2h囊胚存活率為最高(36.37％)，與直接42℃3h熱

4、應(yīng)激處理組(13.07％)相比差異顯著(P＜0.05).在39℃不同時間誘導(dǎo)熱應(yīng)激組中，先經(jīng)39℃3h熱誘導(dǎo)，再經(jīng)42℃3h熱應(yīng)激后囊胚的存活率(38.81％)極顯著(P＜0.01)高于對照組(15.15％).39℃1h和39℃2h熱誘導(dǎo)組存活率（32.81％和34.92％）顯著(P＜0.05)高于對照組(15.15％)，但39℃1h和39℃2h熱誘導(dǎo)組之間差異不顯著(P＞0.05)。
　　 3.不同溫度預(yù)熱應(yīng)激對囊胚HSP70

5、表達的影響
　　 經(jīng)Westernblot檢測，38℃2h，39℃2h和40℃2h預(yù)熱應(yīng)激組內(nèi)囊胚HSP70表達量較37℃對照組均增加。39℃熱應(yīng)激處理2h囊胚HSP70表達量(0.839)極顯著(P＜0.01)高于對照組（0.781);38℃熱應(yīng)激處理2h和40℃熱應(yīng)激處理2h囊胚HSP70表達量（0.806和0.810）也顯著(P＜0.05)高于對照組(0.781)，
　　 4.不同時間預(yù)熱應(yīng)激對囊胚HSP70表達的