熱應(yīng)激預(yù)適應(yīng)后HSP70的表達(dá)及其對大鼠肢體缺血再灌注損傷的影響.pdf

1、【目的】(1)探討大鼠肢體在缺血再灌注損傷過程中熱休克蛋白70(HSP70)表達(dá)情況.(2)探討熱應(yīng)激預(yù)適應(yīng)對肢體缺血再灌注損傷的影響及其作用機(jī)制.(3)為肢體缺血再灌注損傷的臨床治療開辟新的思路.【方法】(1)分別建立大鼠肢體缺血再灌注損傷模型和大鼠熱應(yīng)激預(yù)適應(yīng)模型;(2)實(shí)驗(yàn)動物為體重200~220gSD大白鼠72只,實(shí)驗(yàn)動物隨機(jī)分為三組:①正常對照(Normal Control,NC)組;②缺血再灌注(Ischemia Reper

2、fusion,IR)組:③熱應(yīng)激預(yù)處理后缺血再灌注(Heat Stimulated Pretreatment+Ischemia Reperfusion,HP+IR)組.三組分為四個時間點(diǎn):缺血前1h、缺血再灌注1h、再灌注4h、再灌注12h.(3)應(yīng)用生理多導(dǎo)儀記錄大鼠肛溫、心率等生命體征的變化;應(yīng)用光還原(NBT)法測定SOD活性,硫代巴比妥酸法(TBA)測定MDA的含量;應(yīng)用全自動生化分析儀測定血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT),乳酸脫氫酶

3、(LDH)兩種酶的含量;(4)應(yīng)用Western blot法測定大鼠肢體胖腸肌內(nèi)HSP70的含量;(5)應(yīng)用光學(xué)顯微鏡觀察大鼠腓腸肌組織學(xué)變化.【結(jié)論】(1)大鼠熱應(yīng)激預(yù)適應(yīng)可以影響其生命體征的變化:大鼠的肛溫在熱應(yīng)激預(yù)適應(yīng)后開始升高,隨著時間的延長有所下降,但仍高于正常水平;大鼠的心率在熱應(yīng)激預(yù)適應(yīng)后開始加快,并維持于一個較高的水平;(2)大鼠熱應(yīng)激預(yù)適應(yīng)可使肢體缺血再灌注注后血清中的ALT、L-LDH含量有所降低,提示可一定程度減輕

4、骨骼肌細(xì)胞損傷;(3)大鼠熱應(yīng)激預(yù)適應(yīng)可使肢體缺血再灌注后血清中MDA含量降低和SOD活性升高,可以降低肢體缺血再灌注損傷的程度;(4)HSP70在正常大鼠肢體內(nèi)有基礎(chǔ)表達(dá);HSP70在大鼠熱應(yīng)激預(yù)適應(yīng)后有大量的表達(dá);(5)大鼠熱應(yīng)激預(yù)適應(yīng)后可以誘導(dǎo)HSP70的大量表達(dá),而且HSP70的表達(dá)也有一個過程,一般在缺血前1h有大量的HSP70表達(dá),隨著時間的延長,HSP70的表達(dá)也隨著減少,但在各個時間段熱應(yīng)激預(yù)適應(yīng)后HSP70的表達(dá)量多于