丁苯酞預(yù)處理對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后HSP70與TLR4表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察丁苯酞（NBP）預(yù)處理對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷后不同時(shí)間點(diǎn)的病理形態(tài)學(xué)結(jié)果、細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)表現(xiàn)，研究HSP70（heat shock proteins70，熱休克蛋白70）與TLR4 （Toll-like receptor4，Toll 樣受體4）在局灶性腦缺血再灌注中的表達(dá)規(guī)律及NBP 預(yù)處理對(duì)其表達(dá)規(guī)律的影響，探討NBP 預(yù)處理防治腦缺血病的作用。
　　 方法：1.72只成年雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)對(duì)照

2、組；手術(shù)組；NBP 預(yù)處理組，根據(jù)再灌注時(shí)間不同分別分為再灌注6、12、24、48h 亞組。2.采用線栓法制備大鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈局灶缺血（middle cerebrAlartery occulusion，MCAO）再灌注模型。3.HE染色觀察腦組織形態(tài)病理學(xué)變化；采用DNA 原位末端缺口標(biāo)記法（TUNEL）檢測(cè)神經(jīng)元凋亡；免疫組化法測(cè)定大鼠腦缺血再灌注不同時(shí)間HSP70與TLR4的平均灰度值。
　　 結(jié)果：1.HE 染色發(fā)現(xiàn)NB

3、P 預(yù)處理組在再灌注各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的梗塞灶與缺血再灌注組比較均減小，呈點(diǎn)狀分布并且神經(jīng)元損傷也明顯減輕。2.免疫組化結(jié)果顯示：與假手術(shù)組比較，HSP70在缺血再灌注6h 明顯升高，于24h 達(dá)到峰值(P＜0.05)，TLR4在缺血再灌注6h時(shí)表達(dá)較高，隨灌注時(shí)間延長(zhǎng)表達(dá)逐漸增高(P＜0.05)；NBP 預(yù)處理組HSP70與TLR4 陽性表達(dá)在各時(shí)間點(diǎn)明顯增加但低于手術(shù)組(P＜0.05)。3.TUNEL 染色顯示：缺血再灌注組手術(shù)對(duì)側(cè)及假手術(shù)

4、組大腦半球偶見凋亡細(xì)胞，推測(cè)系生理性壞死的神經(jīng)元；缺血再灌注組缺血半暗帶區(qū)可見大量凋亡細(xì)胞(P＜0.05)；NBP 預(yù)處理組凋亡細(xì)胞數(shù)明顯減少，但高于假手術(shù)組(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：1.線栓法成功的復(fù)制了大鼠局灶性腦缺血再灌注模型，術(shù)后大鼠神經(jīng)功能缺損明顯，HE 染色結(jié)果符合腦梗死病理過程。2.NBP 預(yù)處理可減輕腦缺血再灌注后組織壞死，具有神經(jīng)保護(hù)作用。3.NBP 預(yù)處理對(duì)腦缺血再灌注損傷引起的海馬及皮層的神經(jīng)細(xì)胞凋亡