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文檔簡介
1、【目的】
探討殼寡糖預(yù)處理對大鼠腸缺血再灌注(I/R)損傷回腸組織TLR4表達的影響。
【方法】
1.采用夾閉腸系膜上動脈(SMA)的方法制作輕度和重度腸缺血再灌注損傷模型。將40只成年雄性SD大鼠隨機分為5組,分別為假手術(shù)組(A組)、重度缺血再灌注損傷組(B組)、輕度缺血再灌注損傷組(C組)、殼寡糖對輕度及重度缺血再灌注損傷預(yù)處理組(E及D組)。
2.標(biāo)本處理:取出的回腸組織立即
2、大體觀察,并作一記錄,部分組織用10%甲醛固定,常規(guī)石蠟切片,HE染色,光鏡下觀察,部分組織立即置于-70℃冰箱保存留做實時定量PCR。
3.應(yīng)用HE染色觀察回腸組織病理改變。
4.免疫組化法測定腸組織TLR4蛋白表達部位和強弱。
5.實時定量PCR檢測回腸組織TLR4mRNA的表達變化。
【結(jié)果】
1.腸缺血組(B組和C組)大鼠小腸粘膜明顯出血、糜爛,而殼寡糖預(yù)處理
3、組(D組和E組)大鼠小腸出血、糜爛病變明顯改善(P值均<0.05)。
2.假手術(shù)組(A組)僅在腸黏膜的表面有比較弱的TLR4表達(0.132±0.006);而缺血再灌注損傷組(B組和C組)的回腸黏膜表面、黏膜固有層的T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞、黏膜下層的動靜脈、縱形和環(huán)形肌層等處TLR4表達都比較強(分別為0.212±0.007和0.164±0.017);預(yù)處理組(D及E組)回腸黏膜TLR4表
4、達分別為0.182±0.023和0.144±0.008,分別弱于缺血再灌注損傷組(P值均<0.05)。
3.假手術(shù)組(A組)TLR4mRNA表達值為1.091±0.340,而缺血再灌注損傷組(B組和C組)TLR4mRNA表達水平分別為9.376±2.581和3.703±1.092,均高于A組(P值均<0.01),預(yù)處理組(D及E組)回腸組織TLR4mRNA表達水平分別為3.105±0.973和1.295±0.294,分別低
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