海兔素對刀豆蛋白A誘導大鼠肝損傷的保護作用研究.pdf

1、目的：研究海兔素（Aplysin）對刀豆蛋白A誘導的肝損傷大鼠肝臟組織形態(tài)學及血清中谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）、乳酸脫氫酶（LDH）、腫瘤壞死因子-α(TNF-α）、轉化生長因子-β1（TGF-β1）等的影響，以初步探討海兔素對刀豆蛋白A誘導的肝損傷的保護作用及初步作用機制。
　　方法：1.動物分組及模型建立：兩月齡健康雄性Wistar大鼠40只，按體重隨機分為4組（正常對照組、刀豆蛋白A模型組、海兔素低劑量組、海

2、兔素高劑量組），每組10只。刀豆蛋白A模型組與海兔素低、高劑量組給予刀豆蛋白A15 mg/(kg?bw?w)尾靜脈注射，連續(xù)8周，建立大鼠肝損傷模型；模型建立的同時，正常對照組、刀豆蛋白 A模型組每日給予大豆油灌胃，海兔素低、高劑量組給予100、150 mg/kg海兔素+大豆油灌胃，共持續(xù)8周后，于末次灌胃后禁食12 h后，按體重給予3％戊巴比妥鈉30mg/kg麻醉，腹主動脈取血及留取肝臟組織。2. HE染色觀察肝組織形態(tài)學改變；3.

3、Masson Trichrome及天狼星紅染色觀察肝組織纖維化狀況；4.全自動生化分析儀檢測大鼠血清ALT、AST及LDH水平；5.酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）檢測大鼠血清TNF-α和TGF-β1水平。
　　結果：1. HE染色病理觀察結果顯示，與正常對照組相比，刀豆蛋白A模型組大鼠肝小葉結構模糊紊亂，纖維組織增生明顯，可見灶狀壞死及炎性細胞浸潤，膠原纖維明顯增多，海兔素低、高劑量組大鼠肝細胞壞死程度與模型組比較均有不同程度改善

4、，肝小葉結構紊亂程度減輕，炎性細胞減少，且海兔素高劑量組大鼠肝細胞壞死的改善程度較低劑量組明顯；2. Masson染色結果顯示，刀豆蛋白A模型組膠原纖維則較正常對照組增多，纖維間隔形成，可見弓形纖維，形成假小葉；海兔素干預后膠原纖維表達狀況均有所改善，匯管區(qū)及小葉內、小葉間隔均較模型組減少，且海兔素高劑量組膠原纖維表達更低；3.天狼星紅染色結果顯示，刀豆蛋白A模型組則出現(xiàn)大量膠原纖維，并伴有明顯膠原纖維增生和假小葉的出現(xiàn)；與刀豆蛋白 A

5、模型組比較，海兔素高劑量組肝組織膠原纖維增生明顯減少。4.與正常對照組比較，模型組大鼠血清ALT、AST、LDH和TNF-α及TGF-β1水平均顯著升高（P<0.05），海兔素低、高劑量組血清 ALT、AST、TNF-α水平均較刀豆蛋白 A模型組降低（P<0.05），且海兔素高劑量組降低程度比海兔素低劑量組大（P<0.05）。海兔素高劑量組血清LDH及TGF-β1水平均較刀豆蛋白A模型組顯著降低（P<0.05），在海兔素低劑量組雖然有所