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1、目的:研究轉(zhuǎn)錄因子B ACH2在冠心病患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中的表達(dá)水平,并探討其在冠心病發(fā)病中的作用。
實(shí)驗(yàn)方法:挑選2013年11月至2014年9月在武漢協(xié)和醫(yī)院心內(nèi)科住院病人共110例,根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)分三組:急性冠脈綜合征(ACS)組35例,穩(wěn)定型心絞痛(SA)組35例和冠狀動(dòng)脈造影陰性的對(duì)照組(CONTROL)40例。納入的病人均排除患有其他炎癥性疾病。全部受試者均在入院24小時(shí)內(nèi)采集外周血。采用密度梯度離心法分
2、離外周血單個(gè)核細(xì)胞(P BMC)。選取每組10例P BMC采用免疫磁珠分選技術(shù)分離單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)實(shí)驗(yàn)(RT-PCR)檢測(cè)PBMC及單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞中各自BACH2及TLR4的mRNA表達(dá)量,采用蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western Blot)檢測(cè)PBMC及單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞中各自BAC H2及TL R4的蛋白質(zhì)表達(dá)量。采用酶聯(lián)免疫吸附法(EL ISA)檢測(cè)三組受試者血清標(biāo)本中的ox-LD L及TH1,TH2,
3、TH17和Treg細(xì)胞各自標(biāo)志性細(xì)胞因子(IFN-γ,IL-4,IL-17和TGF-β1)的水平。使用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件SPSS17.0分析三組檢測(cè)數(shù)據(jù)的差異。
結(jié)果:RT-PCR和Western blot檢測(cè)三組受試者PBMC中的BACH2及TLR4的表達(dá)趨勢(shì)一致。和穩(wěn)定型心絞痛組及正常對(duì)照組病人相比較,急性冠脈綜合征組病人外周血單個(gè)核細(xì)胞中的BA CH2表達(dá)量顯著下調(diào),T LR4表達(dá)量顯著上調(diào)。ACS組病人血清中的o x-L
4、DL及TH1,T H2和T H17細(xì)胞的細(xì)胞因子水平較S A組和CO NTR OL組顯著升高,而Tr eg的細(xì)胞因子顯著降低。BAC H2在淋巴細(xì)胞中的表達(dá)量明顯高于單核細(xì)胞。差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:本研究證實(shí)BAC H2與冠心病病情嚴(yán)重程度呈明顯負(fù)相關(guān),冠心病病情越嚴(yán)重的病人,其外周血中的BA CH2表達(dá)量越低。急性冠脈綜合征病人外周血中的高濃度的ox-LD L可能通過激活T LR4下調(diào)BA CH2的表達(dá)。BACH2的低
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