CD40L在冠心病患者病變部位、外周血中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、冠心病是由冠狀動(dòng)脈粥樣硬化所致,長(zhǎng)期的研究表明冠狀動(dòng)脈粥樣硬化是脂質(zhì)和炎癥途徑共同作用的復(fù)雜的慢性炎癥性疾病,其中免疫調(diào)節(jié)起著至關(guān)重要的作用,不穩(wěn)定斑塊突然破裂是引起冠心病臨床事件的罪魁禍?zhǔn)? 近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)CD40L-CD40的相互作用是動(dòng)脈粥樣斑塊形成、發(fā)展、破裂的一種重要炎癥因子,CD40L-CD40為體內(nèi)特異性免疫反應(yīng)系統(tǒng)重要的一對(duì)共刺激分子,參與肌體的體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng).有實(shí)驗(yàn)證明,在人動(dòng)脈粥樣硬化斑塊損傷部位有大

2、量的淋巴細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞均能表達(dá)CD40L,但正常冠脈組織中這些細(xì)胞皆無(wú)CD40L的表達(dá). 本研究在患者冠狀動(dòng)脈病變部位及股動(dòng)脈采血,檢測(cè)sCD40L、淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞CD40L的表達(dá),旨在探討動(dòng)脈粥樣硬化斑塊是否與局部炎癥有關(guān),以及動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性與局部炎癥反應(yīng)之間的關(guān)系. 資料與方法: 一、研究對(duì)象: 冠心病組分急性冠脈綜合征和穩(wěn)定型心絞痛兩組,患者均為本院(浙江省人

3、民醫(yī)院,下同)心內(nèi)科住院病人.急性冠脈綜合征組共20例患者,其中男性15例,女性5例,平均年齡61.72±9.01歲.臨床表現(xiàn)均符合急性冠脈綜合征的診斷標(biāo)準(zhǔn),并全部經(jīng)選擇性冠狀動(dòng)脈造影證實(shí)冠脈有狹窄或閉塞病變,以左前降支、左回旋支、右冠狀動(dòng)脈及主要分支中任何一支血管狹窄程度≥50﹪為陽(yáng)性.穩(wěn)定型心絞痛組共18例患者,其中男性12例,女性6例,平均年齡60.13±10.40歲.均符合穩(wěn)定型心絞痛的診斷標(biāo)準(zhǔn),并全部經(jīng)選擇性冠狀動(dòng)脈造影證實(shí).

4、 對(duì)照組患者也均為本院心內(nèi)科住院病人,共20例患者,男性12例,女性8例,平均年齡59.12±11.13歲,冠狀動(dòng)脈造影顯示為陰性者. 二、方法: 1、一般臨床資料的收集:所有受試者均詳細(xì)詢問(wèn)高血壓、糖尿病、高脂血癥、吸煙史并測(cè)定身高、體重和部分生化指標(biāo). 2、標(biāo)本收集及處理:冠心病組在行冠狀動(dòng)脈介入治療(PCI)前先將Over-the-wire的球囊跨越病變,回撤導(dǎo)絲后,利用球囊內(nèi)腔抽取冠脈內(nèi)血5ml,

5、同時(shí)從股動(dòng)脈鞘內(nèi)抽血5ml,其中各2ml自然凝固后45min,1500r/min離心5min,血清-70℃保存,用于測(cè)定sCD40L.另3ml置入流式細(xì)胞抗凝管中,用于測(cè)定淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞CD40L.對(duì)照組在行冠狀動(dòng)脈造影后,在右冠狀動(dòng)脈口抽血5ml,同時(shí)從股動(dòng)脈鞘內(nèi)抽血5ml,標(biāo)本處理類同于冠心病組. 3、sCD40L的測(cè)定采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清中sCD40L,具體步驟參照試劑盒說(shuō)明書. 4、淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞C

6、D40L的測(cè)定采用CD40L-PE熒光單克隆抗體及IgG<,1>-PE熒光單克隆抗體,用EPICS-X<,L>型流試細(xì)胞儀測(cè)定淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞群上CD40L的表達(dá)百分率. 5、血脂等生化指標(biāo)由我院檢驗(yàn)科檢測(cè). 三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,兩組之間比較采用t檢驗(yàn),三組之間比較采用方差分析,男女比例及吸煙率采用x<'2>檢驗(yàn),CD40L與血脂的相關(guān)性采用相關(guān)分析法進(jìn)行分析.p<0.05為差異

7、有顯著性. 結(jié)果: 1、ACS組、SAP組及C組,三組患者之間年齡、性別、體重指數(shù)、血壓、血脂、血糖、肌酐、尿素氮、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及吸煙者比例均無(wú)顯著性差異(P>0.05). 2、ACS組患者冠脈內(nèi)血sCD4.0L、淋巴細(xì)胞CD40L和單核細(xì)胞CD40L分別為5.34±1.45μg、28.34±11.73﹪、39.31±8.79﹪明顯高于SAP組及C組(p<0.05),而SAP組與C組之間則無(wú)明顯差異(p>0.05)

8、. 3、ACS組患者外周血sCD40L、淋巴細(xì)胞CD40L和單核細(xì)胞CD40L分別為3.87±1.25 μ g、27.57±11.12﹪、39.17±9.83﹪,明顯高于SAP組及C組(p<0.05);而SAP組與C組之間則無(wú)明顯差異(p>0.05). 4、ACS組患者冠脈內(nèi)血sCD40L為5.34±1.45 μ g明顯高于外周血3.87±1.25 μ g(p<0.05);而SAP及C兩組冠脈內(nèi)血與外周血sCD40L之間

9、則無(wú)明顯差異(p>0.05). 5、三組患者冠脈內(nèi)血淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞CD40L分別與外周血淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞CD40L比較,均無(wú)明顯差異(p>0.05). 6、三組患者外周血sCD40L、淋巴細(xì)胞CD40L、單核細(xì)胞CD40L與血脂(TG,TC,HDL-C,LDL-C)的相關(guān)性分析表明,均無(wú)相關(guān)性. 7、ACS組患者與SAP組及C組之間的血脂(TG,TC,HDL-C,LDL-C)的方差分析F值分別為0.341(

10、p>0.05),0.259(p>0.05),0.477(p>0.05),2.666(p>0.05)均無(wú)顯著性差異;而sCD40L、淋巴細(xì)胞CD40L、單核細(xì)胞CD40L的方差分析F值分別為163.960(p<0.05),80.920(p<0.05),199.520(p<0.05)有顯著性差異. 結(jié)論: 1、急性冠脈綜合征患者冠脈病變部位血sCD40L顯著高于自身外周動(dòng)脈血及穩(wěn)定性心絞痛和對(duì)照組,而穩(wěn)定性心絞痛患者冠脈病變

11、部位血sCD40L與外周動(dòng)脈血及對(duì)照組無(wú)顯著差異,證實(shí)穩(wěn)定性心絞痛與炎癥無(wú)明顯關(guān)系,急性冠脈綜合征與斑塊局部炎癥加劇有關(guān),而非全身炎癥所致. 2、急性冠脈綜合征患者外周血sCD40L、單核細(xì)胞CD40L及淋巴細(xì)胞CD40L的表達(dá)高于穩(wěn)定性心絞痛組和非冠心病對(duì)照組,而穩(wěn)定性心絞痛組與對(duì)照組之間差異無(wú)顯著性.說(shuō)明外周血中CD40L的表達(dá)水平也與斑塊的穩(wěn)定性有關(guān),測(cè)定外周血CD40L可作為動(dòng)脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定的一個(gè)重要指標(biāo).