兩種來源人胎盤間充質(zhì)干細胞CD200的差異表達對小鼠皮膚移植免疫調(diào)節(jié)作用的研究.pdf

1、目的：研究兩種來源的人胎盤間充質(zhì)干細胞 CD200的表達差異在小鼠皮膚移植免疫調(diào)節(jié)中的作用及作用機制，為臨床上選擇更好的抑制免疫排斥的干細胞提供一定理論依據(jù)。
　　方法：分離兩種來源細胞；流式細胞術(shù)檢測間充質(zhì)干細胞表面標志分子等的表達情況；流式細胞抗體中和高表達CD200分子的細胞、攜帶CD200基因的腺病毒載體及腺病毒空載體分別轉(zhuǎn)染低表達CD200分子的細胞，將等量PBS及上述處理過的細胞通過尾靜脈注射入將ICR乳鼠皮膚移植至C

2、57BL/6背部建立的皮膚移植免疫排斥模型小鼠體內(nèi)，統(tǒng)計各組皮膚存活時間；術(shù)后第7天，HE染色法觀察小鼠移植部位炎性細胞浸潤情況；RT-PCR法檢測小鼠脾臟中IL-17、IFN-γ、TNF-α、IL-10基因的相對表達量；眼眶靜脈取血，檢測各組小鼠血液中白細胞的含量；ELISA法檢測血液中相應免疫因子的含量。
　　結(jié)果：胎兒側(cè)來源細胞 CD200陽性率明顯高于母體側(cè)。與 PBS組比較：mPMSC組和fPMSC組移植皮膚存活時間均明

3、顯延長；與fPMSC+anti-CD200組比較：fPMSC組移植皮膚存活時間明顯延長；與mPMSC+腺病毒空載體組比較：mPMSC+CD200腺病毒組移植皮膚存活時間明顯延長。HE結(jié)果顯示：細胞移植組炎性細胞的浸潤數(shù)量明顯少于PBS組。RT-PCR結(jié)果顯示：與PBS組比較：mPMSC組IL-17、IFN-γ、TNF-α的相對表達量，fPMSC組TNF-α的相對表達量明顯降低，fPMSC組IL-10的相對表達量明顯升高；與mPMSC組比

4、較：fPMSC組IFN-γ、TNF-α的相對表達量均明顯降低；與 fPMSC組比較：fPMSC+Anti-CD200組 IL-17、TNF-α的相對表達量，fPMSC+Anti-CD200組IFN-γ的相對表達量均明顯升高；與mPMSC+CD200腺病毒載體轉(zhuǎn)染組比較：mPMSC+腺病毒空載體轉(zhuǎn)染組TNF-α、IFN-γ的相對表達量均明顯升高，mPMSC+腺病毒空載體轉(zhuǎn)染組 IL-17的相對表達量明顯升高，mPMSC+腺病毒空載體轉(zhuǎn)染組