負(fù)向免疫調(diào)控分子TREM-2在肺癌發(fā)病中作用及機(jī)制的研究.pdf

1、近年來，隨著對(duì)免疫抑制性細(xì)胞、負(fù)向免疫調(diào)節(jié)分子以及負(fù)向免疫調(diào)節(jié)機(jī)制認(rèn)識(shí)的加深，針對(duì)負(fù)向免疫調(diào)節(jié)而開展的肺癌免疫治療研究備受矚目。髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-2（Triggering receptor expressed on myeloid cells-2，TREM-2）能夠通過DAP-12傳遞抑制性免疫信號(hào)下調(diào)樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等抗原提呈細(xì)胞的吞噬功能以及促炎細(xì)胞因子的釋放，進(jìn)而抑制炎癥反應(yīng)，提示其可作為負(fù)向調(diào)節(jié)分子參與調(diào)控免疫應(yīng)答。本研究通

2、過流式細(xì)胞術(shù)、RT-PCR以及免疫組化等實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測(cè)肺癌患者外周血單核細(xì)胞和肺癌組織中TREM-2的表達(dá)情況，并結(jié)合荷瘤小鼠模型和細(xì)胞共培養(yǎng)等體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)探討腫瘤微環(huán)境能否誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞(DC)表達(dá)TREM-2以及TREM-2介導(dǎo)的免疫抑制信號(hào)在肺癌細(xì)胞逃逸機(jī)體免疫攻擊中的作用。我們發(fā)現(xiàn):1、與健康對(duì)照者比較，肺癌患者外周血中TREM-2+單核細(xì)胞的比例以及單核細(xì)胞膜表面TREM-2的表達(dá)豐度均明顯增高，且肺癌患者瘤內(nèi)組織和瘤旁組織中巨噬

3、細(xì)胞TREM-2的表達(dá)豐度高于其他良性病變者。2、將3LL肺癌細(xì)胞株的培養(yǎng)上清（模擬腫瘤微環(huán)境）添加到DC原代培養(yǎng)體系中可誘導(dǎo)DC膜表面TREM-2的表達(dá)。應(yīng)用CD11c+免疫磁珠陽性分選上述條件下培養(yǎng)的DC（包括TREM-2+DC和TREM-2-DC）能夠抑制T細(xì)胞的活化和增殖，但是，先以TREM-2+免疫磁珠陰性分選再以CD11c+免疫磁珠陽性分選的DC(TREM-2DC)對(duì)T細(xì)胞活化、增殖的抑制作用則明顯減弱。3、流式細(xì)胞儀分選出

4、的TREM-2+CD11c+DC能夠抑制NK細(xì)胞對(duì)Yac-1細(xì)胞的殺傷作用。4、原位3LL肺癌模型小鼠肺組織中TREM-2+CD11c+DC的數(shù)量明顯增加。5、體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)及動(dòng)物模型中分離到的TREM-2+DC，通過檢測(cè)發(fā)現(xiàn)其表面MHCⅡ分子Ⅰa和CD80、CD86的表達(dá)下降，在體外經(jīng)LPS刺激后IL-12的分泌減少，而IL-10的產(chǎn)生增加。這表明TREM-2可通過負(fù)向調(diào)節(jié)荷瘤宿主機(jī)體的免疫功能，促進(jìn)肺癌細(xì)胞的免疫逃逸。本研究為肺癌免疫