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1、牛磺膽酸(TCA)是牛羊膽汁中的有效成分之一,也是其發(fā)揮藥理作用的主要成分之一。本文研究了TCA對胸腺細胞凋亡啟動階段、執(zhí)行階段、生化特征階段以及腹腔巨噬細胞、外周血淋巴細胞和脾臟淋巴細胞凋亡生化特征階段的影響,以探討牛磺膽酸對小鼠免疫細胞凋亡的影響。采用流式細胞術(shù)檢測了TCA對胸腺細胞凋亡磷脂酰絲氨酸外翻百分率,結(jié)果顯示,高劑量TCA在體內(nèi)可顯著抑制胸腺細胞磷脂酰絲氨酸外翻,抑制胸腺細胞凋亡;將TCA與胸腺細胞在體外共同孵育后發(fā)現(xiàn),不
2、同濃度的TCA均能顯著降低磷酯酰絲氨酸外翻,抑制胸腺細胞凋亡。采用分光光度法檢測了TCA對胸腺細胞凋亡過程中Caspase-9蛋白酶的活化程度,體內(nèi)實驗結(jié)果顯示:低劑量、高劑量TCA均可顯著提高凋亡特異蛋白酶Caspase-9的活性,誘導胸腺細胞凋亡:體外實驗結(jié)果顯示:不同濃度TCA與胸腺細胞共同孵育后,中、高劑量TCA均可顯著提高Caspase-9的活化程度,誘導胸腺細胞凋亡,而低劑量TCA則無顯著影響。采用分光光度法檢測了TCA對胸
3、腺細胞凋亡過程中Caspase-3蛋白酶的活化程度,體內(nèi)實驗結(jié)果顯示:低劑量TCA可顯著提高caspase-3的活化程度,誘導細胞凋亡,而高劑量組對胸腺細胞凋亡則無明顯的影響;體外實驗結(jié)果顯示:不同濃度TCA與胸腺細胞共同孵育后,中劑量TCA可顯著提高Caspase-3的活化程度,誘導細胞凋亡,而低劑量TCA和高劑量TCA組則無顯著性作用。采用二苯胺法檢測了TCA對小鼠不同免疫細胞的凋亡百分率。實驗結(jié)果顯示:低劑量、高劑量TCA均能夠顯
4、著增加胸腺細胞凋亡DNA片斷化百分率,誘導胸腺細胞凋亡,但劑量間無顯著性差異;低劑量TCA能夠顯著增加腹腔巨噬細胞凋亡DNA片斷化百分率,誘導小鼠腹腔巨噬細胞凋亡,而高劑量TCA的作用不顯著;低劑量和高劑量TCA均能夠顯著增加外周血淋巴細胞凋亡DNA片斷化百分率,誘導外周血淋巴細胞凋亡;低劑量、高劑量TCA均能顯著降低脾臟淋巴細胞凋亡DNA片斷化百分率,抑制脾臟淋巴細胞的凋亡。結(jié)論:TCA可顯著降低胸腺細胞磷脂酰絲氨酸外翻;能顯著提高C
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