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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察凋亡的大腸癌CT26細(xì)胞對(duì)在體外和體內(nèi),對(duì)小鼠免疫系統(tǒng)細(xì)胞(包括T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞細(xì)胞和巨噬細(xì)胞)的增殖性及功能活性的影響,及對(duì)小鼠體內(nèi)炎性相關(guān)因子表達(dá)是否存在相關(guān)性,并初步探討其可能的機(jī)制或者分子通路。
方法:⑴將凋亡的小鼠大腸癌CT26細(xì)胞、壞死的小鼠大腸癌CT26細(xì)胞及正常的小鼠大腸癌CT26細(xì)胞分別與小鼠CTL、NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞共同培養(yǎng),用51Cr釋放實(shí)驗(yàn)測(cè)定三種免疫細(xì)胞的活性;⑵將三種不同狀態(tài)的CT26
2、細(xì)胞(凋亡、壞死、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期)通過(guò)靜脈輸注小鼠,分離血清得NK細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,用CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖;⑶三色標(biāo)記技術(shù)(抗CD4-FITC、CD25-PE、抗Foxp3-CY)檢測(cè)Treg在不同處理組的表達(dá)狀況;用ELISA檢測(cè)各組CT26細(xì)胞的sFas表達(dá)水平以及不同處理組小鼠血清IL-12、IFN-γ、IL-4、IL-10、TGF-β的含量。
結(jié)果:51Cr釋放實(shí)驗(yàn)結(jié)果表示與凋亡大腸癌CT26細(xì)胞培養(yǎng)的
3、CTL、NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的活性受到抑制(p<0.001);CCK-8方法檢測(cè)結(jié)果顯示凋亡大腸癌CT26細(xì)胞能夠抑制小鼠的NK細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞增殖(p<0.001),凋亡細(xì)胞組的Treg的表達(dá)均較對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞組、壞死細(xì)胞組明顯減弱(p<0.001);ELISA檢測(cè)表示凋亡CT26細(xì)胞的sFas較其他組過(guò)表達(dá)(p<0.05),抗炎癥因子如 IL-4、IL-10、TGF-β水平均高于正常腫瘤細(xì)胞組與壞死腫瘤細(xì)胞組,促炎因
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