5-AIQ抑制PARP對結(jié)腸癌CT26細(xì)胞增殖影響及其機制探討.pdf

1、目的：探討5-氨基異喹啉酮(5-aminoisoquinolinone，5-AIQ)抑制PARP對結(jié)腸癌CT26細(xì)胞增殖的影響及其相關(guān)機制。 方法：采用MTT法、流式細(xì)胞術(shù)分別檢測結(jié)腸癌CT26細(xì)胞離體生長和細(xì)胞周期。激光共聚焦、Western Blot檢測CT26細(xì)胞PARP與NF-κBp65的表達(dá)，電泳遷移率改變分析法(EMSA)檢測結(jié)腸癌CT26細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的結(jié)合活性，免疫共沉淀法分析CT26細(xì)胞核內(nèi)PARP與

2、NF-κBp65復(fù)合物(PARP～NF-κBp65)。 結(jié)果： 1．不同濃度的5-AIQ處理組(100μM、500μM、1000μM)結(jié)腸癌CT26細(xì)胞生長抑制率分別為17.52％、27.63％和39.93％，抑制率隨5-AIQ濃度的增加而增加，差異具統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。5-AIQ處理后，結(jié)腸癌CT26細(xì)胞G<,0>/G<,1>期細(xì)胞增加，S期細(xì)胞減少，且5-AIQ濃度越高，G<,0>/G<,1>期細(xì)胞越多，S期

3、細(xì)胞越少。 2．PARP與NF-κBp65在CT26細(xì)胞內(nèi)存在共表達(dá)，且呈正相關(guān)(P<0.05)。不同5-AIQ處理組與5-AIQ未處理組相比，PARP與NF-κBp65的表達(dá)均減弱，差異具統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，PARP與NF-κBp65亦呈正相關(guān)(P<0.05)。5-AIQ處理組與5-AIQ未處理組相比，結(jié)腸癌CT26細(xì)胞NF-κB的活性降低，差異具統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 PARP與NF-κBp65在CT2

4、6細(xì)胞核內(nèi)能形成復(fù)合物；5-AIQ處理組PARP～NF-κBp65復(fù)合物形成較5-AIQ未處理組減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論： 1．不同5-AIQ處理組，結(jié)腸癌CT26細(xì)胞生長抑制率不同，且隨5-AIQ濃度增加而增加；細(xì)胞周期中G<,0>/G<,1>期細(xì)胞亦較5-AIQ未處理組增加，提示5-AIQ可以抑制CT26細(xì)胞增殖，并對細(xì)胞周期產(chǎn)生影響。 2．5-AIQ處理組結(jié)腸癌CT26細(xì)胞PARP與N