胎兔缺氧缺血性腦損傷模型的建立及缺氧缺血時間探討.pdf

1、目的:
　　建立29天胎齡的胎兔持續(xù)宮內(nèi)缺氧缺血性腦損傷模型，探討合適的持續(xù)宮內(nèi)缺氧缺血時間，為深入研究新生兒缺氧缺血性腦損傷的發(fā)病機制、預防和治療提供合適的動物模型。
　　方法:
　　選擇孕29天的健康新西蘭白兔共19只，實驗組15只，對照組4只。聯(lián)合全身麻醉（包括誘導麻醉和維持麻醉兩個階段）和腰麻對孕兔進行麻醉，孕兔左側股動脈插入4F Fogarty動脈取栓導管，插入深度為10cm，使球囊的位置位于腎動脈開口下端、

2、子宮動脈開口上端，實驗組向?qū)Ч芮蚰覂?nèi)注入300μl生理鹽水，阻斷球囊以下水平血供（包括子宮和下肢血供），并保留20分鐘、25分鐘、28分鐘、30分鐘、40分鐘（各取孕兔3只）后拔出導管;對照組不注入生理鹽水擴張球囊，插入4F Fogarty動脈取栓導管保留30分鐘后拔出導管。
　　孕兔術中監(jiān)測項目包括:
　　1.孕兔呼吸、心率等變化情況。
　　2.右耳中動脈取血送檢血氣分析，監(jiān)測孕兔血PH、PaO2、PaCO2等。

3、r>　　3.插管前后右側股動脈血壓、脈搏變化情況。
　　孕兔術后24h行剖宮產(chǎn)，將新生兔置入設定35℃的嬰兒培養(yǎng)箱內(nèi)保暖。
　　1.紀錄新生兔一般情況，如出生體重、死胎率等。
　　2.采用神經(jīng)行為學評分量表評估新生兔神經(jīng)行為學狀況及受損程度。
　　3.制作病理切片，采用鏈霉卵蛋白素-過氧化物酶法，用凝集素IB4和異凝集素TL了解小膠質(zhì)細胞活化情況，用TUNEL法了解腦細胞的凋亡情況。
　　結果:
　　

4、1.誘導麻醉導致孕兔呼吸頻率和PaO2明顯降低，而PaCO2增高(P＜0.05);進入維持麻醉階段后，孕兔呼吸頻率和血PaO2、PaCO2逐漸趨向穩(wěn)定(P＞0.05);麻醉對孕兔心率的影響較小，整個實驗過程中，孕兔心率無明顯變化(P＞0.05)，實驗組和對照組對麻醉的反應性相似，各時間點兩組孕兔呼吸、心率、PaO2、PaCO2比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);但拔管后實驗組孕兔血乳酸水平較對照組增高(P＜0.05)。
　　2.

5、實驗組插管后孕兔右側股動脈波動消失，血壓測不出;對照組插管前后均可及明顯動脈搏動，血壓無明顯波動(P＞0.05)。
　　3.剖宮產(chǎn)發(fā)現(xiàn)，持續(xù)宮內(nèi)缺氧缺血時間為20分鐘時，胎兔未出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，死胎率為0;持續(xù)宮內(nèi)缺氧缺血時間為28分鐘、25分鐘時，死胎率分別為41.7％、12.5％;當持續(xù)宮內(nèi)缺氧缺血時間≥30分鐘時，所有的胎兔均死亡，死胎率達100％。提示持續(xù)宮內(nèi)缺氧缺血時間越長，越少的新生兔存活，死胎率逐漸升高(P＜0.05)。

6、
　　4.持續(xù)宮內(nèi)缺氧缺血20分鐘組存活新生兔神經(jīng)行為學評分與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);但持續(xù)宮內(nèi)缺氧缺血時間≥25分鐘時，存活新生兔的神經(jīng)行為學評分明顯低于對照組，且神經(jīng)行為學異常隨缺氧缺血時間的延長而更突出(P＜0.05)。
　　5.對照組腦組織小膠質(zhì)細胞呈樹枝狀;缺氧缺血組腦組織小膠質(zhì)細胞大量被激活，呈阿米巴樣，且單位面積內(nèi)小膠質(zhì)細胞數(shù)目多于對照組（P＜0.05）。持續(xù)宮內(nèi)缺氧缺血實驗組存活新生兔腦組