慢性肉芽腫病的臨床特征及基因診斷.pdf

1、慢性肉芽腫（Chronic granulomatous disease，CGD）是一種吞噬細胞功能缺陷病，由于還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH，又稱還原型輔酶Ⅱ）氧化酶缺陷的某些成分缺失或減少，使吞噬細胞不能有效地產(chǎn)生具有殺菌活性的超氧陰離子及其代謝產(chǎn)物，不能殺傷過氧化物酶陽性細菌與真菌，引起反復嚴重感染。其臨床特征為：嬰幼兒期起病，以反復發(fā)作嚴重的細菌或真菌感染為突出表現(xiàn)，感染主要發(fā)生在肺、皮下組織、淋巴結(jié)和胃腸道等，肉芽腫

2、形成為其特征性表現(xiàn)，肝、脾、骨骼及肛周部位膿腫的形成為重要表現(xiàn)。大約70％的CGD為X-連鎖隱性遺傳（X-CGD），少數(shù)為常染色體隱性遺傳（AR-CGD）。
　　 目的：
　　 1.探討本組慢性肉芽腫病的臨床及實驗室特征；
　　 2.基因診斷X-CGD和AR-CGD患兒，指導臨床治療；
　　 3.基因分析發(fā)現(xiàn)攜帶者，進行相關(guān)遺傳咨詢；
　　 4.對攜帶者的胎兒進行產(chǎn)前診斷，避免CGD患兒出生。

3、r>　　 方法：
　　 1.分析7例X-CGD及1例AR-CGD臨床及實驗室檢查資料。
　　 2.經(jīng)DHR123流式細胞術(shù)中性粒細胞呼吸爆發(fā)試驗，檢測CGD患兒及家系成員中性粒細胞氧化功能。
　　 3.用RT-PCR及DNA-PCR直接測序法分析7例X-CGD患兒及家系成員外周血細胞的CYBB基因；
　　 4.用RT-PCR及DNA-PCR直接測序法分析X-CGD攜帶者胎兒羊水細胞CYBB基因，進行產(chǎn)前

4、基因診斷。
　　 5.用RT-PCR及DNA-PCR直接測序法分析1例AR-CGD患兒及家系成員外周血細胞的NCF1基因。
　　 6.用T-A克隆方法分析1例AR-CGD患兒的外周血白細胞NCF1mRNA的多樣性。
　　 結(jié)果：
　　 1.臨床特征及實驗室檢查
　　 本組7例X-CGD男性患兒，平均起病年齡4個月、診斷年齡2歲。均以“長期反復發(fā)熱”為主訴入院，反復發(fā)作的肺炎最多見（100％），肺結(jié)

5、核4例（57.1％），反復腹瀉4例（57.1％），淋巴結(jié)炎4例（57.1％），肛周膿腫3例（42.9％），真菌性肺炎3例（42.9％），播散型卡介苗病2例（28.6％），敗血癥2例（28.6％），典型的皮膚肉芽腫1例（14.3％）。主要病原體包括金黃色葡萄菌（42.9％），肺炎克雷桿菌（28.6％），抗酸桿菌（14.3％）。AR-CGD女性患兒，以反復肺炎為主，伴有長期口腔潰瘍，其它合并癥少。8例患兒均生長發(fā)育延遲的表現(xiàn)。實驗室檢查：8

6、例患兒NBT均為0％；均有IgG、IgA、IgM升高，白細胞升高，以中性為主；6例患兒B超顯示：肝脾腫大，50％伴有低密度結(jié)節(jié)影及鈣化灶。3例患兒胸片提示：肺部炎癥病變、結(jié)節(jié)狀致密影或團狀影等。本組患兒，死亡率高（71.4％），僅2例有明顯的家族史。
　　 2.中性粒細胞氧化功能
　　 8例患兒中性粒細胞氧化指數(shù)（NOI）為1-2，顯著低于正常人（>100），患兒母親的中性粒細胞氧化指數(shù)正常或低于正常人。
　　

7、3.基因分析
　　 7例X-CGD患兒均存在CYBB基因突變，其中缺失突變3例（1182delC，1091delG，579-582delATTA），拼接錯誤3例（IVS10+2dupT，IVS5+1G>A，497-498ins115bp），無義突變1例（690C>T）。6例患兒母親為突變基因攜帶者。例1X-CGD母親（攜帶者）的胎兒正常。AR-CGD女性患兒為NCF1基因純和缺失突變（75-76 delGT）。
　　 結(jié)