魔芋DNA分子標記技術(shù)及其初步應用.pdf

1、本研究將DNA分子標記技術(shù)(ISSR標記和AFLP標記) 用于魔芋的遺傳研究，優(yōu)化了有關(guān)的反應條件，完善了適用于魔芋遺傳育種研究的DNA分子標記技術(shù)，建立了魔芋DNA分子標記技術(shù)體系。ISSR和AFLP標記首次在魔芋研究中應用。所用的材料分為兩部分，30份魔芋材料和13份魔芋材料。 1 利用ISSR技術(shù)對30份魔芋種質(zhì)資源進行DNA多態(tài)性分析。這30份資源是從云南省各地廣泛收集來的，經(jīng)過了初步的分類學鑒定，其中既有野生種材料(

2、6份)，也有大面積種植的5個種：花魔芋(Amorphophallus konjac)(16份)，白魔芋(Amorphophallus albus)(5份)，西盟魔芋(Amorphophallus krausei)(1份)，甜魔芋(Amorphophallus dunnii)(1份)，株芽魔芋(Amorphophallus guripingensis)(1份)。從65個隨機引物中篩選出11個擴增基因組DNA，共獲116條帶，其中102條為

3、多態(tài)性標記，每個引物平均提供10.55個標記信息。UPMGA法聚類分析結(jié)果表明：這30份魔芋種質(zhì)資源間的Jaccard相似系數(shù)都比較大，各樣品間的相似系數(shù)為0.65-0.95，各魔芋樣品間的差異并不十分明顯，甜魔芋和花魔芋以及西盟魔芋和株芽魔芋的關(guān)系比較近，野生魔芋分別聚在花魔芋、白魔芋和甜魔芋中，同一種的聚在一起，其中白魔芋的遺傳多樣性較為豐富。甜魔芋聚類于花魔芋中，西盟魔芋和株芽魔芋聚在一起，說明甜魔芋和花魔芋以及西盟魔芋和株芽魔芋

4、的關(guān)系比較近。白魔芋聚為兩大類，這兩類之間差異較大，說明白魔芋的遺傳多樣性較為豐富，并且它與花魔芋的關(guān)系較近。野生的魔野24(樣品27) 與甜魔芋聚在一起，所以野生的魔野24也應屬于甜魔芋；野生魔芋30(樣品22)、野生魔芋1(樣品23)、野生魔芋2(樣品24)和野生魔芋4(樣品26) 一起聚類于花魔芋中，應屬于花魔芋。野生魔芋3(樣品25) 聚類于白魔芋中，應屬于白魔芋。這幾個野生樣品的分子聚類的分類結(jié)果與形態(tài)分類的結(jié)果是完全吻合的。

5、 2 利用AFLP技術(shù)對13份魔芋種質(zhì)資源進行DNA多態(tài)性分析。這13份品種包括花魔芋、白魔芋、西盟魔芋和珠芽魔芋。從10對引物中篩選出2對引物擴增基因組DNA，共獲得112條帶，其中64條為多態(tài)性標記，每個引物平均提供56個標記信息。這13份魔芋種質(zhì)資源間的Jaccard相似系數(shù)都比較大，各樣品間的相似系數(shù)為0.48-0.77。UPMGA法聚類分析結(jié)果表明：魔芋資源的遺傳多態(tài)性比較豐富，西盟魔芋和株芽魔芋的關(guān)系比較近，平均相

6、似系數(shù)為0.68，白魔芋和花魔芋的關(guān)系比較近，平均相似系數(shù)為0.64。花魔芋中除花魔芋1、花魔芋2和花魔芋9之外的聚為一類，白魔芋聚為第二類，珠芽魔芋聚為第三類，西盟魔芋聚為第四類?；в?、花魔芋2和花魔芋9 與西盟魔芋的相似系數(shù)分別高達0.77、0.72和0.68，所以這三個花魔芋資源和西盟魔芋的遺傳關(guān)系應該很近，所以它們是否屬于花魔芋值得進一步研究。在花魔芋中，來自巴東的花魔芋3和花魔芋8沒有聚在一起，其它的材料也沒有區(qū)域性分布。