RAPD分子標(biāo)記技術(shù)在中藥材百合研究中的應(yīng)用.pdf

1、目的：百合為百合科(Liliaceae)百合屬(lilium)植物卷丹Liiium lancifolium Thunb．、百合L.brownii F.E．Brown var.viridulumBaker和細(xì)葉百合L．pumilumDC．的干燥肉質(zhì)鱗葉，為臨床常用中藥材，也是湖南省大宗道地藥材之一。對(duì)中藥材百合的鑒定，國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)資料中報(bào)道主要采用的方法是性狀鑒別、顯微鑒別和理化鑒別，目前從分子水平探討其遺傳差異并對(duì)其進(jìn)行鑒別僅見(jiàn)一篇相關(guān)研

2、究報(bào)道。本研究應(yīng)用RAPD技術(shù)對(duì)湖南、甘肅、江蘇、江西、廣西五個(gè)產(chǎn)地的百合及大百合Cardiocrinum giganteum(Wall．)Makino進(jìn)行了分析，探討了分子生物學(xué)技術(shù)在中藥材百合品種品系鑒定及親緣關(guān)系分析上的應(yīng)用，為鑒定中藥材百合品種品系的新方法提供了充分的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 研究方法：采用RAPD技術(shù)對(duì)百合鱗葉基因組DNA的多態(tài)性進(jìn)行分析；利用紫外凝膠成像系統(tǒng)通過(guò)對(duì)電泳圖像分析建立了百合基因組DNA指紋圖譜；利用NT

3、SYS軟件進(jìn)行品種品系間UPGMA聚類(lèi)分析。 研究結(jié)果與結(jié)論： 1、建立了適合百合的PCR-RAPD反應(yīng)體系； 2、從120條隨機(jī)引物中篩選出35條有效引物，對(duì)所有供試材料進(jìn)行擴(kuò)增，共獲得35張DNA電泳圖譜，769條DNA譜帶，其中767條為多態(tài)帶； 3、利用凝膠成像分析系統(tǒng)，對(duì)電泳圖像進(jìn)行分析，建立了DNA的指紋圖譜； 4、建立了基于RAPD技術(shù)的百合親緣關(guān)系樹(shù)型圖，樹(shù)型圖的聚類(lèi)結(jié)果與用經(jīng)典方法鑒定的