eLF4E對人食管磷癌裸鼠移植瘤及化療敏感性的影響.pdf

1、目的:
　　通過裸鼠皮下移植瘤的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，觀察真核細(xì)胞翻譯起始因子4E(eukaryotic initiation factor4E，eIF4E)的表達(dá)對人食管鱗癌生長速度及其對順鉑的化療敏感性的影響。
　　方法:
　　1、復(fù)蘇未處理的食管鱗癌EC9706細(xì)胞及前期已建立的eIF4E沉默食管鱗癌EC9706細(xì)胞和eIF4E過表達(dá)食管鱗癌EC9706細(xì)胞，進(jìn)行傳代培養(yǎng)，建立三種人食管鱗癌裸鼠移植瘤動(dòng)物模型予以順鉑干預(yù)，生

2、理鹽水對照。
　　2、觀察裸鼠及皮下移植瘤的一般情況，記錄各組移植瘤的生長情況、繪制腫瘤生長曲線，處死裸鼠，完整剝離腫瘤組織，稱量移植瘤重量。
　　3、通過qRT-PCR、Western Blot和免疫組織化學(xué)法對各組移植瘤組織中eIF4E的表達(dá)進(jìn)行檢測。
　　結(jié)果:
　　1、成功建立人食管鱗癌EC9706不同細(xì)胞株的裸鼠移植瘤模型，經(jīng)HE染色病理學(xué)檢測，證實(shí)模型具有類似人食管鱗癌的病理學(xué)特征。
　　2、未

3、處理的EC9706細(xì)胞接種的裸鼠平均成瘤時(shí)間5天，eIF4E沉默EC9706細(xì)胞接種的裸鼠平均成瘤時(shí)間7天，eIF4E過表達(dá)EC9706細(xì)胞接種的裸鼠平均成瘤時(shí)間4天。順鉑干預(yù)后，未處理的EC9706細(xì)胞接種組裸鼠皮下移植瘤體積為1341.49±333.43 mm3，瘤重為1.3745±0.3685g; eIF4E沉默EC9706細(xì)胞接種組裸鼠皮下移植瘤體積為658.92±472.12mm3，瘤重為0.6083±0.2817g，與未處理

4、的EC9706細(xì)胞接種組裸鼠比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);eIF4E過表達(dá)EC9706細(xì)胞接種組裸鼠皮下移植瘤體積為2246.75±814.25mm3，瘤重為1.9790±0.4342g，與未處理的EC9706細(xì)胞接種組裸鼠比較有顯著性差異(P＜0.05)。生理鹽水干預(yù)后，未處理的EC9706細(xì)胞接種組裸鼠皮下移植瘤體積為2066.51±543.48mm3，瘤重為2.3671±0.3847g; eIF4E沉默EC9706細(xì)胞接種

5、組裸鼠皮下移植瘤體積為1416.27±396.59mm3，瘤重為1.2363±0.4582g，與未處理的EC9706細(xì)胞接種組裸鼠比較有顯著性差異(P＜0.05); eIF4E過表達(dá)EC9706細(xì)胞接種組裸鼠皮下移植瘤體積為3432.61±878.15mm3，瘤重為2.9912±0.4201g，與未處理的EC9706細(xì)胞接種組裸鼠比較有顯著性差異(P＜0.05)。
　　3、未處理EC9706細(xì)胞接種+順鉑干預(yù)、未處理EC9706細(xì)

6、胞接種+生理鹽水對照、eIF4E沉默細(xì)胞接種+順鉑干預(yù)、eIF4E沉默細(xì)胞接種+生理鹽水對照、eIF4E過表達(dá)細(xì)胞接種+順鉑干預(yù)、eIF4E過表達(dá)細(xì)胞接種+生理鹽水對照各組裸鼠皮下移植瘤組織用qRT-PCR檢測eIF4E mRNA相對表達(dá)量，結(jié)果分別為:3.7440±0.80317、3.9417±1.15404、1.0767±0.10443、1.0883±0.10323、15.8250±3.43139、15.8533±2.82740;

7、Western Blot檢測各組eIF4E蛋白表達(dá)量，結(jié)果分別為0.7515±0.14425、0.7998±0.18601、0.5391±0.15702、0.5394±0.17053、1.0565±0.23503、1.1386±0.29452;用免疫組織化學(xué)法檢測各組eIF4E蛋白的免疫組化染色評分分別為:2.4000±1.14018、2.1667±0.75277、1.0000±0.89443、1.0000±0.89443、6.6667

8、±3.01109、7.0000±3.46410。上述檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析表明:eIF4E沉默細(xì)胞接種+順鉑干預(yù)、eIF4E過表達(dá)細(xì)胞接種+順鉑干預(yù)與未處理EC9706細(xì)胞接種+順鉑干預(yù)比較，有顯著性差異(P＜0.05); eIF4E沉默細(xì)胞接種+生理鹽水對照、eIF4E過表達(dá)細(xì)胞接種+生理鹽水對照與未處理EC9706細(xì)胞接種+生理鹽水對照比較，有顯著性差異(P＜0.05);未處理EC9706細(xì)胞接種+順鉑干預(yù)與未處理EC9706細(xì)胞接種

9、+生理鹽水對照比較、eIF4E沉默細(xì)胞接種+順鉑干預(yù)與eIF4E沉默細(xì)胞接種+生理鹽水對照比較、eIF4E過表達(dá)細(xì)胞接種+順鉑干預(yù)與eIF4E過表達(dá)細(xì)胞接種+生理鹽水對照比較，均無顯著性差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、成功建立未處理EC9706細(xì)胞、eIF4E沉默細(xì)胞及eIF4E過表達(dá)細(xì)胞三種人食管鱗癌裸鼠移植瘤模型。
　　2、沉默eIF4E可減緩食管鱗癌生長，eIF4E過表達(dá)可加快食管鱗癌生長。