2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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文檔簡介

1、擬南芥CBF(CRT/DRE binding factor)轉錄因子在冷應答途徑中具有重要作用，一個CBF轉錄因子能激活下游眾多與抗逆有關的功能基因的表達。雖然植物中存在多條冷應答途徑，但目前對CBF途徑的研究最為深入，功能最確切，所以CBF基因家族是植物抗寒分子育種的首選目標。 本文利用PCR技術首次從山葡萄(Vitis amurensis)中分離并克隆了兩個新的CBF基因(基因銀行注冊號碼為DQ517297和DQ517298

2、)，分別命名為VaCBF2和VaCBF3；同時，構建了兩基因的植物表達載體。主要研究結果如下： 1.通過將GenBank上發(fā)表的幾種植物的CBF同源基因進行比較在其保守區(qū)域設計一對兼并引物，采用PCR方法從山葡萄cDNA中獲得兩個大小分別為536bp和527bp的CBF基因中間片段，并進行了克隆，測序。 2.在兩中間片段區(qū)域分別設計了兩對特異引物，采用反向PCR方法對山葡萄CBF基因的5’和3’端的非編碼區(qū)進行克隆，結果

3、分別得到兩長度約1200bp和1000bp的片段。與中間片段拼接后預測基因全長區(qū)域。 3.在預測的全長區(qū)域的非編碼區(qū)分別設計一對特異引物對山葡萄基因組進行擴增，分別得到954bp和885bp的片段。經測序證實得到的序列即為CBF基因全長，分別命名為VaCBF2和VaCBF3。 4.應用DNAMAN軟件將VaCBF2和VaCBF3全長與Genebank上發(fā)表的幾種植物CBF基因進行氨基酸同源性比較，結果發(fā)現VaCBF2和V

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