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1、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文兩個(gè)小麥MBD基因的克隆、植物表達(dá)載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化姓名：劉昊英申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：植物資源學(xué)指導(dǎo)教師：孟凡榮20090501CloningofTwoMBDGenes，ConstructionofTheirPlantExpressionVectorsandGeneticTransformationwithWheatSupervisor：AssociateProfMengFanrongMasterCandid
2、ate：LiuHaoyingABSTRACT：DNAMethylationplaysimportantregulationrolesingeneexpression，cellulardifferentiationandphylogeneticdevelopmentMBDisakindoftrans—actingfactorwhichbindingwithDNAmethylation，andplayaconsiderablefunctio
3、ndruingthegrowthanddevelopmentinplantTheopenreadingframe(ORE)oftwoMBDwereisolatedbyinsilicocloningandRTPCRmethod，OverexpressionandRNAiexpressionvectorsforthemwereconstructed，andweretransformedwithwheatbythepollentubemedi
4、atedtransformationmethodsSometransgenticplantletswereconfirmedbypreliminaryidentificationThemainresultsareasfollows：1Twogeneswhichencodemethyl—CpGbindingproteinwerecloned，designatedTaMBDlandTaMBD2Sequenceanalysisshowedth
5、attheeDNAofTaMBDIis668bpinlengthandthecodingregion579bp，whichcontains36bpin5’UTRand53bpin3’UTRThegenomestructureanalysisindicatethata1386bpintronwasincludedinTaMBDlTheeDNAofTaMBD2is1427bpinlengthandthecodingregion942bp，w
6、hichcontains131bpin5’UTRand354bpin3’UTR2SequenceanalysisandBLASTXresultsrevealedthatTaMBD1andTaMBD2hadhighsimilaritytoagroupofMBDproteingenesofdifferentspeciesTaMBDlhashigheraminoacidsequencesimilaritywithMBDinrice(Acces
7、sionnumber：CT831688)，maizeMBDl01(Accessionnumber：EU976548)andArabidopsisAtMBDl(Accessionnumber：NM一1184015)were76％，74％and49％，respectivelyTaMBD2hassimilarityaminoacidswithZeamaysMBD108(Accessionnumber：AAK40309)，Arabidopsis
8、AtMBD2(Accessionnumber：NP一974850)were73％，60％，respectivelyTheinterProanalysisshowedthatthededucedaminoacidofclonedgenescontainstypicalMBDconservativeregionPhylogeneticanalysissuggestedthatthetwogenesbelongedtodifferentsub
9、classes，theTaMBD1WasincludedinIIsubclasswithAtMBD1andAtMBD4，andTaMBD2wasbelongedtoIIIsubclasswithAtMBD2，whichimpliedthattwonewMBDgeneswereislatedinwheat3TheoverexpressionandrepressionexpressionvectorsofTaMBD1andTaMBD2wer
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