亞硝酸鹽對粗蛋白質(zhì)測定的影響及其測定方法的改進(jìn)研究.pdf

1、本試驗將從鹽酸溶液濃度的標(biāo)定方法、蒸餾儀器的選擇、飼料中亞硝酸鹽含量等方面對飼料中粗蛋白質(zhì)含量測定時產(chǎn)生的影響以及飼料中亞硝酸鹽含量測定方法的比較及改進(jìn)進(jìn)行研究。
　　凱氏定氮法是食品和飼料中測定粗蛋白質(zhì)應(yīng)用最廣泛也是最經(jīng)典的方法，其中鹽酸溶液濃度的標(biāo)定是凱氏定氮法中至關(guān)重要的一步，鹽酸溶液濃度的標(biāo)定方法分為無水碳酸鈉法和硼砂法。無水碳酸鈉標(biāo)定法需要在270℃～300℃干燥至恒重，操作較費時費事，且指示劑顏色不易把握;而硼砂標(biāo)定法

2、中只說是干燥的硼砂，并未說明干燥程度以及如何干燥。蒸餾裝置是凱氏定氮法中的重要儀器，分為半微量蒸餾裝置和全自動凱氏定氮儀等類型，不同蒸餾裝置對測定結(jié)果的影響尚無報道。試驗表明:無水碳酸鈉須在270℃～300℃干燥至恒重才可標(biāo)定鹽酸。380℃干燥至恒重的硼砂在標(biāo)定鹽酸時計算式中的硼砂分子式要按無水硼砂計算;100℃干燥的硼砂不可以用于鹽酸標(biāo)定;正常室溫密閉存放的硼砂更適于北方地區(qū)實驗室進(jìn)行鹽酸標(biāo)定（因為南方濕度較大）。全自動凱氏定氮儀較半

3、微量蒸餾裝置測定準(zhǔn)確性更好。
　　亞硝酸鈉存在于飼料原料及配合飼料中，尤其在魚粉、肉骨粉及青綠飼料中含量較大，目前沒有試驗研究表明飼料中亞硝酸鹽對其粗蛋白質(zhì)含量測定是否產(chǎn)生影響，但是通過人為向標(biāo)準(zhǔn)樣品硫酸銨中加入一定濃度梯度的亞硝酸鈉后，發(fā)現(xiàn)測出的硫酸銨中的氮含量減少，損失的氮含量與亞硝酸鈉的添加量呈現(xiàn)一定的線性關(guān)系。向牛血清白蛋白和飼料中加入亞硝酸鈉后會出現(xiàn)同樣的線性關(guān)系。試驗表明:亞硝酸鹽的存在會對凱氏定氮法測定粗蛋白質(zhì)時產(chǎn)生

4、一定的副作用，會與部分含氮化合物反應(yīng)，降低蛋白含量的真實值，嚴(yán)重影響粗蛋白質(zhì)測定的準(zhǔn)確性。
　　草酸是最簡單的有機(jī)二元酸之一，結(jié)構(gòu)簡式HOOCCOOH。NO2-中的N為+3價，所以既有氧化性，又有還原性，在酸性介質(zhì)中呈現(xiàn)較強(qiáng)的氧化能力。與很弱的草酸、乙酸均可反應(yīng)?？赡艿姆磻?yīng)為:2NO2-+2H+=NO+NO2↑+H2O。向加有不同濃度梯度亞硝酸鈉的硫酸銨混合物中分別加入0.1mol/l、0.5mol/l、1mol/l的草酸溶液，待

5、反應(yīng)充分后加入濃硫酸。經(jīng)過試驗結(jié)果分析得出:草酸溶液的加入不能消除亞硝酸鈉對粗蛋白質(zhì)測定的影響，所測出的硫酸銨中的氮含量與亞硝酸鈉的添加量仍然呈現(xiàn)一定的線性關(guān)系。
　　為了對飼料中亞硝酸鹽含量進(jìn)行有效的檢測，首先要確定比較可靠、準(zhǔn)確的測定方法。飼料中亞硝酸鹽的測定方法分別為GB/T13085-2005版和GB13085-91版兩種。試驗采用兩版國標(biāo)法對同一樣品進(jìn)行檢測，分別對兩種方法的準(zhǔn)確度和精確度進(jìn)行比較。同時對2005版前處理