亞硝酸鹽對粗蛋白質測定的影響及其測定方法的改進研究.pdf

1、本試驗將從鹽酸溶液濃度的標定方法、蒸餾儀器的選擇、飼料中亞硝酸鹽含量等方面對飼料中粗蛋白質含量測定時產(chǎn)生的影響以及飼料中亞硝酸鹽含量測定方法的比較及改進進行研究。
　　凱氏定氮法是食品和飼料中測定粗蛋白質應用最廣泛也是最經(jīng)典的方法，其中鹽酸溶液濃度的標定是凱氏定氮法中至關重要的一步，鹽酸溶液濃度的標定方法分為無水碳酸鈉法和硼砂法。無水碳酸鈉標定法需要在270℃～300℃干燥至恒重，操作較費時費事，且指示劑顏色不易把握;而硼砂標定法

2、中只說是干燥的硼砂，并未說明干燥程度以及如何干燥。蒸餾裝置是凱氏定氮法中的重要儀器，分為半微量蒸餾裝置和全自動凱氏定氮儀等類型，不同蒸餾裝置對測定結果的影響尚無報道。試驗表明:無水碳酸鈉須在270℃～300℃干燥至恒重才可標定鹽酸。380℃干燥至恒重的硼砂在標定鹽酸時計算式中的硼砂分子式要按無水硼砂計算;100℃干燥的硼砂不可以用于鹽酸標定;正常室溫密閉存放的硼砂更適于北方地區(qū)實驗室進行鹽酸標定（因為南方濕度較大）。全自動凱氏定氮儀較半

3、微量蒸餾裝置測定準確性更好。
　　亞硝酸鈉存在于飼料原料及配合飼料中，尤其在魚粉、肉骨粉及青綠飼料中含量較大，目前沒有試驗研究表明飼料中亞硝酸鹽對其粗蛋白質含量測定是否產(chǎn)生影響，但是通過人為向標準樣品硫酸銨中加入一定濃度梯度的亞硝酸鈉后，發(fā)現(xiàn)測出的硫酸銨中的氮含量減少，損失的氮含量與亞硝酸鈉的添加量呈現(xiàn)一定的線性關系。向牛血清白蛋白和飼料中加入亞硝酸鈉后會出現(xiàn)同樣的線性關系。試驗表明:亞硝酸鹽的存在會對凱氏定氮法測定粗蛋白質時產(chǎn)生

4、一定的副作用，會與部分含氮化合物反應，降低蛋白含量的真實值，嚴重影響粗蛋白質測定的準確性。
　　草酸是最簡單的有機二元酸之一，結構簡式HOOCCOOH。NO2-中的N為+3價，所以既有氧化性，又有還原性，在酸性介質中呈現(xiàn)較強的氧化能力。與很弱的草酸、乙酸均可反應?？赡艿姆磻獮?2NO2-+2H+=NO+NO2↑+H2O。向加有不同濃度梯度亞硝酸鈉的硫酸銨混合物中分別加入0.1mol/l、0.5mol/l、1mol/l的草酸溶液，待

5、反應充分后加入濃硫酸。經(jīng)過試驗結果分析得出:草酸溶液的加入不能消除亞硝酸鈉對粗蛋白質測定的影響，所測出的硫酸銨中的氮含量與亞硝酸鈉的添加量仍然呈現(xiàn)一定的線性關系。
　　為了對飼料中亞硝酸鹽含量進行有效的檢測，首先要確定比較可靠、準確的測定方法。飼料中亞硝酸鹽的測定方法分別為GB/T13085-2005版和GB13085-91版兩種。試驗采用兩版國標法對同一樣品進行檢測，分別對兩種方法的準確度和精確度進行比較。同時對2005版前處理