HO-1調(diào)控Nrf2-ARE信號(hào)通路對(duì)腦出血后神經(jīng)保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的與背景:
　　腦出血后繼發(fā)的腦組織損傷是影響預(yù)后、轉(zhuǎn)歸的關(guān)鍵因素,而炎性因子及自由基的瀑布式產(chǎn)生對(duì)腦出血后繼發(fā)性腦損傷起決定性作用。研究發(fā)現(xiàn)血紅素加氧酶-1(HO-1)廣泛在中樞神經(jīng)細(xì)胞(神經(jīng)元及膠質(zhì)細(xì)胞)中表達(dá),是Nrf2-ARE信號(hào)通路下游一重要抗氧化及解毒蛋白,對(duì)腦出血后繼發(fā)性腦損傷具有抗炎性反應(yīng)、減輕氧化應(yīng)激損傷、抑制細(xì)胞凋亡等神經(jīng)保護(hù)作用。本研究運(yùn)用HO-1的選擇性抑制劑鋅原卟啉-9(ZPP-IX)抑制HO-1表達(dá),

2、觀察用藥后Nrf2-ARE通路上下游蛋白Nrf2、NF-κB等表達(dá)的變化并結(jié)合神經(jīng)功能評(píng)分的差異來(lái)探討HO-1對(duì)腦出血灶周神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制,為腦出血的治療提供新的實(shí)驗(yàn)理論依據(jù)。
　　方法:
　　采用SD雄性大鼠基底節(jié)自體股動(dòng)脈血注射法建立腦出血模型,分四組:正常組、ICH組、ZPP-IX+ICH組、DMSO+ICH組。通過(guò)免疫熒光、Western blot、RT-PCR觀察術(shù)后各組不同時(shí)間點(diǎn)血腫周?chē)鷅inding-Nrf2

3、(Nrf2-Keap1)、Nrf2、HO-1、NF-κBp65、TNF-α蛋白及相應(yīng)mRNA表達(dá)變化并結(jié)合神經(jīng)功能評(píng)分,對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(單因素方差分析,t檢驗(yàn))。
　　結(jié)果:
　　ICH組較正常對(duì)照組Nrf2、HO-1、NF-κB、TNF-α的表達(dá)在術(shù)后6h即開(kāi)始升高,48-72h達(dá)峰,至第7天表達(dá)量仍高于正常組,而binding-Nrf2的表達(dá)在腦出血后12h開(kāi)始減少,48h減少最明顯。ZPP-IX組與ICH組比

4、較,神經(jīng)功能障礙加重,出血灶周binding-Nrf2、NF-κBp65、TNF-α表達(dá)增加,Nrf2、HO-1表達(dá)減少,差異在48-72h最明顯,且差異持續(xù)到第7天。DMSO組較ICH組神經(jīng)功能評(píng)分及各蛋白表達(dá)無(wú)明顯差異。
　　結(jié)論:
　?、臜O-1在腦出血后早期表現(xiàn)出神經(jīng)保護(hù)作用;
　?、颇X出血后6h開(kāi)始Nrf2-ARE信號(hào)通路激活,表現(xiàn)為Nrf2及下游HO-1的表達(dá)增多,而這一變化與ICH后腦水腫的高峰時(shí)間一致,