茚蟲威亞致死劑量對(duì)褐飛虱和二化螟保幼激素和保幼激素酯酶基因影響的比較研究.pdf

1、褐飛虱Nilaparvata lugens(St(a)l)(Hemiptera: Delphacidae)屬同翅目，飛虱科;二化螟Chilo suppressalis(Lepidoptera: Pyralidae)屬鱗翅目，夜蛾科，同為水稻上的重要害蟲。近年來，新型噁二唑類殺蟲劑茚蟲威在生產(chǎn)中廣泛使用防治水稻等作物的鱗翅目害蟲（如二化螟、三化螟、稻縱卷葉螟）等。前期的研究表明亞致死劑量的茚蟲威抑制了褐飛虱生殖。而昆蟲的生殖主要受卵黃蛋白

2、的卵黃蛋白原調(diào)節(jié)，而保幼激素調(diào)控卵黃蛋白合成。保幼激素酯酶屬羧酸酯酶家族，水解保幼激素為無生物活性的保幼激素酸。本文研究了亞致死劑量茚蟲威對(duì)褐飛虱和二化螟保幼激素Ⅲ含量及保幼激素酯酶基因mRNA相對(duì)表達(dá)水平的影響，進(jìn)一步揭示茚蟲威抑制生殖的機(jī)理，比較研究其對(duì)同一生境下的靶標(biāo)與非靶標(biāo)害蟲的亞致死生殖效應(yīng)，對(duì)害蟲綜合治理及茚蟲威的藥效評(píng)價(jià)和合理使用具有重要的指導(dǎo)意義。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明如下:
　　1.茚蟲威亞致死劑量處理褐飛虱雌蟲保幼激素Ⅲ

3、含量和保幼激素酯酶基因Nljhe mRNA表達(dá)量的影響
　　茚蟲威處理的褐飛虱交配前后1，3和5d雌蟲體內(nèi)保幼激素Ⅲ含量均隨殺蟲劑濃度的增加而顯著降低。交配前1，3和5d保幼激素Ⅲ含量的平均值分別比對(duì)照降低了32.2％，31.7％和44.5％;交配后1，3和5d保幼激素Ⅲ含量的平均值與對(duì)照相比，降低了42.8％，52.3％和46.4％。此外，茚蟲威處理的褐飛虱交配后雌蟲保幼激素Ⅲ含量顯著高于交配前，表明交配促進(jìn)了雌蟲保幼激素Ⅲ的合

4、成。
　　隨著茚蟲威濃度的增加褐飛虱雌蟲Nljhe基因mRNA的表達(dá)水平升高。茚蟲威濃度與交配前、后褐飛虱雌蟲Nljhe基因mRNA的表達(dá)水平呈線性相關(guān)，特別是交配前和交配后3d。交配前1、3和5d褐飛虱雌蟲Nljhe基因mRNA的表達(dá)水平的平均值分別是對(duì)照的4.8、5.0和4.4倍，交配后1，3和5 dNljhe基因mRNA的表達(dá)水平的平均值分別是對(duì)照的6.5、7.6和5.3倍。茚蟲威處理顯著誘導(dǎo)交配前后褐飛虱雌成蟲Nljhe基

5、因mRNA的表達(dá)水平。此外，交配后1、3、5d的Nljhe基因mRNA的相對(duì)表達(dá)水平分別高于交配前1、3、5d，表明交配誘導(dǎo)褐飛虱雌蟲Nljhe基因mRNA的表達(dá)。
　　2.茚蟲威亞致死劑量處理二化螟幼蟲保幼激素Ⅲ含量和保幼激素酯酶基因Csjhe mRNA表達(dá)量的影響
　　通過反轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(RT-PCR)克隆了二化螟保幼激素酯酶基因cDNA片段，長(zhǎng)為1292bp.與家蠶Bombyx mori(Lepidopter

6、a: BombMsidae)、粘蟲（Mythimna separata）(Lepidoptera: Noctuidae)和云杉卷葉蛾Choristoneurafumiferana（Lepidoptera: Tortricidae）的JHE相似度較高，分別為78％、74％、71％。
　　處理3d后的4齡幼蟲體內(nèi)的保幼激素Ⅲ的含量隨茚蟲威濃度的增加而顯著降低。與對(duì)照相比，0.8、0.4、0.2、0.1 g/L茚蟲威處理二化螟3齡幼蟲3

7、d后，保幼激素Ⅲ含量分別降低了37.7％、32.0％、22.3％和11.0％，說明茚蟲威抑制了保幼激素的合成。處理6d后的5齡幼蟲體內(nèi)的保幼激素Ⅲ含量無顯著差異，但與處理3d后的4齡幼蟲相比，除0.8 g/L處理外，其體內(nèi)保幼激素Ⅲ的平均含量均低于處理3d后的幼蟲，說明二化螟末2齡幼蟲體內(nèi)的保幼激素滴度開始下降。
　　與對(duì)照相比，除0.1 g/L茚蟲威處理外，4齡幼蟲保幼激素酯酶基因CsjhemRNA的相對(duì)表達(dá)量隨殺蟲劑濃度的升高

8、而顯著升高。0.2、0.4、0.8 g/L的茚蟲威處理后，二化螟4齡幼蟲的Csjhe mRNA的相對(duì)表達(dá)量分別是對(duì)照的1.38、1.92、5.25倍。0.1、0.2 g/L的茚蟲威處理后，二化螟5齡幼蟲體內(nèi)的Csjhe mRNA的相對(duì)表達(dá)量分別是對(duì)照的1.46和1.87倍，但其他濃度處理后，5齡幼蟲體內(nèi)的Csjhe mRNA的相對(duì)表達(dá)量反而下降。
　　3.茚蟲威亞致死劑量處理對(duì)褐飛虱雌蟲和二化螟幼蟲保幼激素Ⅲ含量和保幼激素酯酶基因