HPLC法檢測(cè)炎琥寧原料藥及其粉針劑方法學(xué)研究.pdf

1、炎琥寧為穿心蓮提取物，具有較強(qiáng)的抗病毒作用和市場(chǎng)前景，目前劑型為注射用炎琥寧。本實(shí)驗(yàn)擬建立可用于檢測(cè)注射用炎琥寧的質(zhì)量體系。 根據(jù)所查閱文獻(xiàn)，選用紫外分光光度法進(jìn)行注射用炎琥寧定量檢測(cè)，測(cè)得平均含量在99.5％-100％，RSD平均為0.19％,方法簡(jiǎn)便快速并具可靠性。但紫外分光光度法為痕量檢測(cè)靈敏度高，對(duì)于純度要求很高的原料藥等并不適用。在非常規(guī)條件下產(chǎn)生穿心蓮內(nèi)酯在炎琥寧測(cè)定波長(zhǎng)處有吸收，容易對(duì)炎琥寧檢測(cè)產(chǎn)生干擾，因此本實(shí)驗(yàn)

2、研究使用HPLC法進(jìn)行炎琥寧的含量檢測(cè)。 由于未見HPLC法測(cè)定炎琥寧相關(guān)研究報(bào)道，因此本實(shí)驗(yàn)選用HPLC法測(cè)定炎琥寧類似物質(zhì)效果較好的五個(gè)流動(dòng)相條件，分別用于炎琥寧系統(tǒng)適應(yīng)性檢測(cè)，并改變流動(dòng)相比例和pH值，結(jié)果在甲醇-0.05％磷酸二氫鉀溶液(pH值為2.5±0.05)(7：3)條件下測(cè)定效果最好，其理論塔版數(shù)為4812，峰型較好拖尾因子為1.02<1.05，與其他峰完全分離(分離度為2.75)，重復(fù)進(jìn)樣檢測(cè)RSD=0.18％

3、，n=10。 使用以上HPLC條件測(cè)定炎琥寧原料藥。重復(fù)進(jìn)樣6次測(cè)得含量平均值為103.16％，RSD為0.16％，方法重現(xiàn)性和樣品穩(wěn)定性較好。在40-300μg·ml-1范圍內(nèi)藥物濃度和峰面積呈良好的線性(r=0.9994 n=6)，平均回收率為99.84％，RSD=0.32％,方法準(zhǔn)確度高，精確可靠。本藥物溶液在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差RSD為0.25％。經(jīng)過破壞性實(shí)驗(yàn)證明雜質(zhì)和降解物對(duì)本方法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果并無顯著影響。

4、對(duì)不同批次炎琥寧進(jìn)行抽檢，測(cè)得含量檢測(cè)范圍在99.37％-100.31％ RSD=0.38％。符合HPLC法標(biāo)準(zhǔn)中的98％～102％，RSD≤2％的范圍，方法準(zhǔn)確可靠，可作為注射用炎琥寧的檢測(cè)方法理論基礎(chǔ)。 按原料藥HPLC條件和方法測(cè)定注射用炎琥寧，輔料峰在主成分峰的檢測(cè)范圍以外出現(xiàn)，因此對(duì)檢測(cè)結(jié)果無影響。本HPLC條件最低檢測(cè)限約為0.0056μg·ml-1，藥物含量檢測(cè)和雜質(zhì)定量檢測(cè)靈敏度高，注射用炎琥寧在40-300μg

5、·ml-1內(nèi)，其峰面積和濃度線性回歸關(guān)系良好(r=0.9995 n=6)；平均回收率為99.73％，RSD=0.40％ n=6。本藥物溶液在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定,峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差RSD為0.25％，穩(wěn)定性好。將高溫試驗(yàn)，氧化試驗(yàn)，強(qiáng)酸試驗(yàn)，強(qiáng)堿試驗(yàn)結(jié)果與未破壞實(shí)驗(yàn)對(duì)照，發(fā)現(xiàn)雖然注射用炎琥寧在各條件下不穩(wěn)定，但是分離度均大于1.5，降解產(chǎn)物峰與測(cè)定峰完全分離，因此使用本方法和條件檢測(cè)注射用炎琥寧的專屬性好。測(cè)得注射用炎琥寧含量范圍在99.5％