動脈中膜平滑肌細胞凋亡促進受體骨髓細胞參與移植物動脈硬化的研究.pdf

1、研究背景：
　　 慢性排斥反應(yīng)引起的移植物動脈硬化是導(dǎo)致遠期移植物功能喪失的主要因素。移植物動脈硬化的主要病理特征是血管新生內(nèi)膜形成導(dǎo)致管腔狹窄及其引起的移植器官缺血性改變；而受體骨髓細胞遷移并分化為血管平滑肌細胞是移植物動脈新生內(nèi)膜形成的主要細胞學(xué)基礎(chǔ)。目前研究發(fā)現(xiàn)，移植物動脈中膜平滑肌細胞凋亡是器官植入后的早期病理學(xué)改變，但是，其在移植物動脈硬化中的作用機制至今尚不清楚。
　　 研究目的：
　　 探討移植物動

2、脈中膜平滑肌細胞凋亡對受體骨髓細胞參與移植物動脈硬化的作用機制。
　　 研究方法：
　　 制備性別錯配嵌合體大鼠腹主動脈移植模型，并體內(nèi)感染攜帶p53和Bcl-XL凋亡相關(guān)基因的慢病毒。移植術(shù)后2周和8周制備移植動脈組織切片，免疫組化檢測靶基因p53和Bcl-XL的特異性表達，并檢測SDF-1α、TGF-β和PDGF-BB等細胞因子在移植血管壁的蛋白水平；TUNEL 染色定量分析移植動脈中膜平滑肌細胞凋亡情況；病理組織學(xué)

3、分析檢測移植動脈新生內(nèi)膜增生病變；并且，采用激光顯微切割技術(shù)，收集新生內(nèi)膜SMα-actin 陽性細胞，用PCR分析探討移植動脈新生內(nèi)膜平滑肌細胞的來源。
　　 研究結(jié)果：免疫組化顯示靶基因p53和Bcl-XL在移植動脈壁特異性表達，且以移植動脈中膜為主。病理組織學(xué)分析提示p53基因轉(zhuǎn)染特異性誘導(dǎo)移植動脈中膜平滑肌細胞凋亡，引起血管壁SDF-1α和TGF-β表達明顯升高，并促進移植動脈新生內(nèi)膜形成及動脈硬化；而Bcl-XL基因轉(zhuǎn)

4、染顯著抑制中膜平滑肌細胞凋亡，下調(diào)SDF-1α和TGF-β表達水平，從而減少移植動脈內(nèi)膜增生。PCR分析提示p53 轉(zhuǎn)染組新生內(nèi)膜細胞中的雄性來源細胞 (Sry mRNA 水平)較載體組顯著增多(P<0.01)，而Bcl-XL組新生內(nèi)膜細胞中的雄性來源細胞較載體組顯著減少(P<0.01)。
　　 研究結(jié)論：
　　 移植動脈中膜平滑肌細胞凋亡通過上調(diào)SDF-1α和TGF-β表達誘導(dǎo)受體外周血骨髓干細胞遷移至移植動脈內(nèi)膜，并