大豆花葉病毒毒株間的交叉保護(hù)作用研究及HC-Pro基因的克隆分析.pdf

1、大豆花葉病毒(Soybean Mosaic Virus，SMV)病是世界性病害，分布非常廣泛，嚴(yán)重影響大豆的產(chǎn)量和外觀品質(zhì)。國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)大豆花葉病毒株系間的交叉保護(hù)作用進(jìn)行了一定研究，本研究的目的是以來(lái)源不同的SMV毒株為材料，研究交叉保護(hù)現(xiàn)象在SMV上存在的普遍性；研究不同類(lèi)型保護(hù)處理組合間保護(hù)效果的差異以及接種間隔和接種處理方法對(duì)交叉保護(hù)效果的影響；研究交叉保護(hù)作用對(duì)大豆部分性狀的影響，為探索交叉保護(hù)作用在防治大豆花葉病毒病上的應(yīng)用

2、奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下： 1.鑒定了54個(gè)SMV毒株在7個(gè)大豆品種上的癥狀反應(yīng)。結(jié)果表明，同一SMV毒株在不同大豆品種上的癥狀反應(yīng)不同，同一大豆品種感染不同SMV毒株的癥狀反應(yīng)也不同。大豆花葉病毒在大豆植株上的癥狀類(lèi)型有花葉和壞死，部分植株同時(shí)表現(xiàn)兩種癥狀。從54個(gè)SMV毒株中篩選到11個(gè)分別在不同品種上表現(xiàn)穩(wěn)定癥狀的毒株。 2.利用11個(gè)SMV毒株和5個(gè)大豆品種確定了8個(gè)交叉保護(hù)處理的組合，各處理不同間隔時(shí)間接種、

3、不同接種處理交叉保護(hù)作用研究結(jié)果表明：不同接種間隔天數(shù)即不同時(shí)間挑戰(zhàn)接種的交叉保護(hù)作用存在較明顯差異，間隔7天保護(hù)效果顯著好于3、5、9、11天。不同處理方法也影響交叉保護(hù)作用，采用先后接種兩個(gè)毒株可表現(xiàn)保護(hù)作用，兩毒株汁液等體積接種或同時(shí)各接一片真葉則不表現(xiàn)保護(hù)作用。各交叉保護(hù)處理的復(fù)合接種試驗(yàn)表明，SMV毒株間存在交叉保護(hù)作用，毒株之間的交叉保護(hù)作用存在程度差異。一般以花葉毒株作為保護(hù)毒株，表現(xiàn)較高的保護(hù)作用，以壞死毒株作為保護(hù)毒株

4、，幾乎不表現(xiàn)保護(hù)作用。 表現(xiàn)較高保護(hù)作用的處理中，SMV對(duì)病情指數(shù)、葉面積、根干重的影響較小，SMV對(duì)株高、葉綠素含量、根瘤鮮重的影響在品種間存在差異。保護(hù)作用較差的處理中，SMV對(duì)病情指數(shù)、葉面積、葉綠素含量、根干重的影響較大，SMV對(duì)株高、根瘤鮮重的影響在品種間存在差異。 3.采用TA克隆的方法測(cè)定了6個(gè)SMV毒株的HC-Pro基因序列，得到的HC-Pro基因全長(zhǎng)均為1371nt，推導(dǎo)的氨基酸序列為457個(gè)氨基酸殘基

5、。核苷酸及氨基酸序列分析表明，HC-Pro蛋白擁有行使功能的結(jié)構(gòu)域：與病毒移動(dòng)有關(guān)的CCC基序和與病毒CP中DAG基序結(jié)合的PTK基序。6個(gè)SMV毒株的HC-Pro基因同源性較高，核苷酸同源性為89.2％～99.9％，氨基酸同源性為95.4％～99.8％，其中親緣關(guān)系最近的是TS216和4434，僅有1個(gè)堿基差異。在13個(gè)SMV毒株中，HZ1與其余12個(gè)毒株親緣關(guān)系稍遠(yuǎn)。研究表明，SMV毒株的HC-Pro基因同源性與毒株在鑒別寄主上的致