煙草脈帶花葉病毒、蕪菁花葉病毒和馬鈴薯Y病毒的遺傳結(jié)構(gòu)分析.pdf

1、煙草脈帶花葉病毒（Tobacco vein banding mosaic virus，TVBMV）、馬鈴薯Y病毒（Potato virus Y，PVY）和蕪菁花葉病毒（Turnip mosaic virus，TuMV）都屬于馬鈴薯Y病毒屬（Potyvirus）。TVBMV和PVY是煙草上的重要病毒，在我國(guó)煙草上的危害呈上升趨勢(shì)；TuMV是十字花科植物上的重要病毒。它們侵染作物后造成作物產(chǎn)量和品質(zhì)的下降。本研究分別分析了TVBMV、TuM

2、V和PVY三種病毒的群體結(jié)構(gòu)。
　　 從中國(guó)煙草主產(chǎn)區(qū)采集到40個(gè)TVBMV分離物，測(cè)定了其HC-Pro、P3、6K1和CP基因，通過(guò)比較GenBank上其它分離物的相應(yīng)序列分析了TVBMV的遺傳多樣性和種群結(jié)構(gòu)。根據(jù)不同基因的分析結(jié)果，將TVBMV分離物劃分為兩個(gè)（6K1和CP）或三個(gè)組（P3和HC-Pro）。中國(guó)云南分離物單獨(dú)成簇，基因交流頻繁，但與其它省份分離物之間的基因交流不頻繁。TVBMV的4個(gè)基因片段都處于負(fù)向選擇，

3、但不同的基因片段承受的選擇壓力不同。分析的42個(gè)分離物中有13個(gè)發(fā)生重組。
　　 通過(guò)RT-PCR擴(kuò)增得到中國(guó)的56個(gè)TuMV蘿卜分離物的3'-末端基因組序列，分析其群體變異。中國(guó)105個(gè)分離物（含GenBank上49個(gè)）中，共有12個(gè)分離物存在明顯重組。系統(tǒng)進(jìn)化樹結(jié)果表明，中國(guó)TuMV可分為Asian-BR、basal-BR和world-B三個(gè)組，有50.5％的分離物位于basal-BR組中。中國(guó)basal-BR組分為3個(gè)亞組

4、，Ⅰ和Ⅱ亞組與日本的basal-BRⅠ、Ⅱ亞組一致，但是Ⅲ亞組單獨(dú)成簇，日本還存在Ⅳ亞組。濰坊和泰安的basal-BR分離物是新出現(xiàn)的譜系，處于爆發(fā)狀態(tài)。TuMV每個(gè)組或亞組都處于負(fù)向（純化）選擇。泰安和濰坊地區(qū)的分離物基因交流頻繁。
　　 從中國(guó)煙草主要種植區(qū)采集PVY分離物，接種到莧色藜（Chenopodiumamaranticolor）上，經(jīng)過(guò)多次單斑分離獲得25個(gè)生物純的分離物。測(cè)定了這25個(gè)分離物的HC-Pro和CP序

5、列及另外4個(gè)分離物的CP序列。25個(gè)分離物中有22個(gè)能引起煙草葉脈壞死，3個(gè)引起煙草花葉或脈明。19個(gè)分離物用PVYo CP單克隆抗體檢測(cè)呈現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)。血清學(xué)和分子進(jìn)化分析表明，25個(gè)分離物中有3個(gè)為O株系、2個(gè)為N株系、2個(gè)為NTN株系、16個(gè)為N-Wi株系和2個(gè)為N-HcO株系。Feixian8和Mengyin60屬于N-HcO株系，他們具有類似PVYo株系的HC-Pro與類似PVYN株系CP基因，但是能引起煙草葉脈壞死，為新的株系

6、。HC-Pro和CP編碼區(qū)處于負(fù)向選擇，但是HC-Pro序列的7個(gè)氨基酸和CP序列的6個(gè)氨基酸處于正向選擇。PVY的亞種群不具有寄主特異性，不同亞種群承受的選擇壓力不同。
　　 馬鈴薯X病毒（Potato virus X，PVX）是常見(jiàn)的植物病毒之一，主要侵染茄科植物。本研究測(cè)得了一株1985年的PVX分離物（PVX-1985）的全基因組序列。PVX-1985不包括Poly（A）尾巴共6435個(gè)核苷酸（nucleotides，n