白菜與蕪菁花葉病毒的互作機(jī)理.pdf

1、蕪菁花葉病毒(Turnip mosaic virus，TuMV)是蕓薹屬作物的主要病原之一，嚴(yán)重影響大白菜(Brassica campestris L.ssp.pekinensis)與不結(jié)球白菜(Brassica campestrisssp.chinensis Makino)的產(chǎn)量和品質(zhì)。大白菜與不結(jié)球白菜均原產(chǎn)于我國(guó)，其品質(zhì)柔嫩、風(fēng)味獨(dú)特、營(yíng)養(yǎng)豐富，不僅是亞洲最重要的蔬菜之一，也逐漸受到世界各地人們的喜愛(ài)。近年來(lái)，研究推測(cè)TuMV的6

2、K2囊泡為病毒的復(fù)制場(chǎng)所，6K2囊泡的形成與運(yùn)動(dòng)均與宿主細(xì)胞的分泌途徑、SNARE蛋白的合成等直接相關(guān)。本研究以大白菜為材料，分析了大白菜分泌途徑在病毒與寄主互作中的作用，研究了BrSNAREs家族對(duì)TuMV病毒侵染的響應(yīng)，為大白菜與TuMV互作機(jī)理的研究提供了理論基礎(chǔ)。同時(shí)，以不結(jié)球白菜為材料，免疫共沉淀分離TuMV病毒的6K2囊泡，并對(duì)其蛋白組份進(jìn)行分析，為不結(jié)球白菜與TuMV互作機(jī)理的研究以及TuMV病毒復(fù)制機(jī)理的研究奠定了基礎(chǔ)。

3、
　　1.利用擬南芥基因芯片技術(shù)對(duì)接種了TuMV的大白菜進(jìn)行了全面的基因表達(dá)分析，從中檢測(cè)到3，470個(gè)差異表達(dá)基因，其中包括2，013個(gè)上調(diào)基因，1，457個(gè)下調(diào)基因。從這一系列響應(yīng)病毒侵染的差異基因中篩選得到38個(gè)與分泌途徑相關(guān)的基因。通過(guò)qRT-PCR進(jìn)一步驗(yàn)證這些基因?qū)Σ《厩秩镜捻憫?yīng)，其結(jié)果與微陣列分析結(jié)果基本一致。由此，我們推測(cè)寄主的分泌途徑參與了病毒的復(fù)制和運(yùn)動(dòng)。同時(shí)，結(jié)合前人提出的TuMV病毒在宿主細(xì)胞中的復(fù)制模型，

4、繪制了這些分泌途徑基因的分布圖，進(jìn)一步鑒定出了這些基因在病毒復(fù)制與運(yùn)輸中的確切功能，對(duì)深入研究大白菜與TuMV的互作機(jī)制以及大白菜的抗病育種具有重要意義。
　　2.通過(guò)生物信息學(xué)分析研究了大白菜SNARE家族成員的分類、保守結(jié)構(gòu)域、以及染色體分布情況。根據(jù)SNARE家族成員氨基酸的種類，將BrSNAREs分為Q-SNAREs、R-SNAREs兩大類，它們不均勻地分布在大白菜基因組的10條染色體上。同時(shí)，研究了大白菜SNARE家族成

5、員在6個(gè)不同器官的表達(dá)情況，以及該家族成員在TuMV病毒誘導(dǎo)情況下的表達(dá)情況。BrSNAREs在不同器官中的表達(dá)不同，不同類型的BrSNAREs基因在TuMV病毒誘導(dǎo)下表達(dá)情況也不相同，推測(cè)大白菜SNARE家族成員可能參與了大白菜的局部或系統(tǒng)防御反應(yīng)。這種分析對(duì)于理解SNARE蛋白的功能具有重要意義，有助于植物-病毒互作機(jī)制的研究，為改進(jìn)大白菜遺傳特性奠定了基礎(chǔ)。
　　3.本研究對(duì)102份不結(jié)球白菜進(jìn)行TuMV抗病性調(diào)查，選取易感