白細(xì)胞介素-1F7基因Thr42Ala錯(cuò)義突變的功能學(xué)研究.pdf

1、白細(xì)胞介素（Interleukin）是一類(lèi)具有調(diào)節(jié)和激活免疫細(xì)胞、介導(dǎo)淋巴細(xì)胞的增殖活化作用，并參與炎癥反應(yīng)的細(xì)胞因子。白細(xì)胞介素1家族（Interleukin-1 family， IL-1F）成員大多是促炎細(xì)胞因子，人類(lèi)白細(xì)胞介素-1F7（IL-1F7）作為其中為數(shù)較少的抑炎細(xì)胞因子之一，是IL-1家族中唯一的與鼠非同源基因。
　　IL-1F7基因位于2號(hào)染色體，有五種不同的剪切變體（IL-1F7a、IL-1F7b、IL-1F7

2、c、IL-1F7d、IL-1F7e），IL-IF7b是最長(zhǎng)的轉(zhuǎn)錄本，是參與炎癥相關(guān)性疾病的發(fā)生的重要基因。正常情況下IL-1F7b主要在細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)，脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）刺激可引起IL-1F7進(jìn)入細(xì)胞核表達(dá)。
　　位于IL-1F7第二個(gè)外顯子的單核苷酸多態(tài)性（SNP）位點(diǎn)rs3811047為A→G堿基變異，可導(dǎo)致IL-1F7第42位氨基酸編碼由蘇氨酸（Threonine，Thr）變?yōu)楸彼幔ˋla

3、nine，Ala）。本研究主要對(duì)該基因變異的功能進(jìn)行細(xì)胞學(xué)分析，并研究Thr42Ala錯(cuò)義突變對(duì)IL-1F7基因功能的影響。
　　構(gòu)建了IL-1F7-EGFP-C1及IL-1F7-Thr42Ala-EGFP-C1質(zhì)粒，針對(duì)IL-1F7及其錯(cuò)義突變Thr42Ala對(duì)細(xì)胞凋亡的影響和細(xì)胞核定位兩方面作了研究，結(jié)果顯示：（1）IL-1F7野生型及突變型都能抑制細(xì)胞的凋亡，二者對(duì)細(xì)胞凋亡的抑制作用無(wú)明顯差異。由于LPS能引起細(xì)胞凋亡，且炎

4、癥與細(xì)胞凋亡關(guān)系密切，在研究中首次發(fā)現(xiàn)了IL-1F7可顯著抑制由LPS引起的細(xì)胞凋亡，這為研究IL-1F7的功能提供了新線(xiàn)索；（2）正常情況下，IL-1F7野生型及Thr42Ala錯(cuò)義突變主要在細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)，LPS能引起二者進(jìn)入細(xì)胞核，且二者在細(xì)胞的定位無(wú)顯著性差異，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)也顯示該突變蛋白與野生型無(wú)顯著性差異，提示該突變可能是通過(guò)影響IL-1F7細(xì)胞中定位以外的其他機(jī)制參與了炎癥相關(guān)性疾病的調(diào)控。
　　綜上所述，本次研究對(duì)