BML-111下調(diào)OPN抑制Hela細(xì)胞（宮頸癌）增殖和遷移.pdf

1、分類號：密級：UDC：學(xué)號：406520412360南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文BML111下調(diào)下調(diào)OPN抑制抑制Hela細(xì)胞（宮頸癌）增殖細(xì)胞（宮頸癌）增殖和遷移遷移BML111inhibitedtheProliferationMigrationofHelacells(cervicalcancer)bydownregulatingOsteopontin戴華培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)研究生院醫(yī)學(xué)部指導(dǎo)教師姓名、職稱：李里香主任醫(yī)師郝華博

2、士申請學(xué)位的學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱：病理學(xué)與病理生理學(xué)論文答辯日期：2015年06月10日答辯委員會主席：評閱人：摘要II摘要目的目的：人乳頭狀瘤病毒（Humanpapillomavirus，HPV）持續(xù)感染引起的宮頸慢性炎癥是導(dǎo)致宮頸癌發(fā)生的最主要原因。脂氧素(lipoxins，LXs)是炎癥反應(yīng)的“剎車信號”[12]。故推測脂氧素類似物（BML111）可能通過抑制宮頸慢性炎癥來抑制宮頸癌的發(fā)生。本實(shí)驗(yàn)擬用脂多糖(Lipopoly

3、sacides，LPS)體外模擬炎癥微環(huán)境，觀察BML111對LPS誘導(dǎo)的宮頸癌Hela細(xì)胞株的增殖和遷移的影響。并與沉默OPN基因的Hela細(xì)胞比較，再次觀察BML111對細(xì)胞增殖和遷移的影響，并對其發(fā)生機(jī)制進(jìn)行研究，為宮頸癌的臨床治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：方法：（1）通過MTT實(shí)驗(yàn)，應(yīng)用LPS誘導(dǎo)Hela細(xì)胞的炎癥反應(yīng)，并檢測BML111對細(xì)胞存活率的影響；（2）通過Westernblot（免疫印跡法）觀察BML111對LPS誘導(dǎo)的H

4、ela細(xì)胞OPN、P53、MMP2及MMP9蛋白表達(dá)的影響；（3）通過轉(zhuǎn)染沉默OPN基因的質(zhì)粒，在人Hela細(xì)胞產(chǎn)生OPN表達(dá)的抑制，通過Westernblot方法再次觀察BML111對LPS誘導(dǎo)的Hela細(xì)胞OPN、P53、MMP2及MMP9蛋白表達(dá)的影響；（4）通過劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)，用LPS誘導(dǎo)Hela細(xì)胞的出現(xiàn)炎癥反應(yīng)后，觀察BML111對Hela細(xì)胞遷移的影響。結(jié)果：結(jié)果：（1）MTT顯示，用不同濃度的LPS刺激

5、Hela細(xì)胞檢測24h細(xì)胞存活率，空白組、100，10，1，0.1μgmLLPS刺激組OD值分別為0.83190.01894，1.16110.01548，1.15870.01805，1.14860.01209，1.15020.01653，LPS的四個(gè)濃度組均能促進(jìn)Hela細(xì)胞增殖（P0.05）。（2）MTT結(jié)果顯示，200μgLBML111對LPS誘導(dǎo)的Hela細(xì)胞增殖結(jié)果如下，空白組、LPS組、LPSBML111組和LPSBML111