MicroRNA-21促進(jìn)宮頸癌HeLa細(xì)胞增殖并下調(diào)PDCD4蛋白表達(dá).pdf

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文MicrNA21促進(jìn)宮頸癌HeLa細(xì)胞增殖并下調(diào)PDCD4蛋白表達(dá)姓名：姚青申請學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：屈良鵠20090608MicroRNA21促進(jìn)宮頸癌HeLa細(xì)胞增殖并下調(diào)PDCD4蛋白表達(dá)細(xì)胞的增殖和生長狀況。結(jié)果顯示，抑制內(nèi)源miR21會(huì)對HeLa細(xì)胞的增殖產(chǎn)生明顯的抑制作用，在抑制細(xì)胞增殖的同時(shí)還可能促進(jìn)細(xì)胞凋亡。我們還用熒光素酶雙報(bào)告載體系統(tǒng)，在HeLa細(xì)胞內(nèi)檢測了miR21對

2、Pdcd43’UTR預(yù)測靶標(biāo)位點(diǎn)的作用。結(jié)果證明在HeLa細(xì)胞中miR21能夠直接作用于Pdcd43’UTR并抑制熒光素酶的表達(dá)，并且僅預(yù)測位點(diǎn)的18bp序列片段也具有抑制的功能。這樣抑制的效應(yīng)會(huì)隨著我們對3UTR靶標(biāo)區(qū)域的突變而回復(fù)，說明抑制效應(yīng)確實(shí)是由靶標(biāo)位點(diǎn)序列引起。最后，我們用westernblot檢測了antimiR21轉(zhuǎn)染細(xì)胞后PDCD4蛋白的表達(dá)量。wt：stem的結(jié)果顯示抑制內(nèi)源miR21之后會(huì)上調(diào)PDCD4蛋白的表達(dá)。

3、PDCD4蛋白是細(xì)胞中重要的抑癌基因，有研究顯示這個(gè)基因可以抑制蛋白質(zhì)的合成。因此，抑制內(nèi)源miR21使得PDCD4表達(dá)上調(diào)，也從某種程度上支持了miR21在HeLa細(xì)胞中作為致癌基因的可能性。綜上所述，本論文初步研究了miR21在HeLa細(xì)胞中的功能以及作用機(jī)制。這將miR21作為人類中致癌基因的普遍性向一種新的癌癥細(xì)胞推進(jìn)了一步，并可為以后在宮頸癌細(xì)胞中miR21的分子機(jī)制的研究提供有價(jià)值的參考。關(guān)鍵詞：microRNA21，PDC