獻血員隱匿性乙肝感染篩查安全性和病毒學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　 了解我國健康獻血員隱匿性乙肝病毒感染者的流行率。探討國內(nèi)血站對獻血員乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)篩查的安全性和可靠性。進一步改進獻血員HBV篩查方法，減少HBV的漏檢率；分析隱匿性乙肝感染者病毒S區(qū)，探討引起隱匿性感染的原因。
　　 方法：
　　 1.收集經(jīng)中心血站依據(jù)國家衛(wèi)生部制定的血庫安全的要求雙篩HBsAg陰性、抗-HCV陰性、抗-HIV陰性、梅毒螺旋體抗體陰性、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT＜40

2、IU/ml)陰性的合格獻血員血漿2～3ml。-20℃保存；
　　 2.雅培Architect I2000電化學(xué)發(fā)光儀檢測HBsAg定量；Nest-PCR擴增乙肝病毒S區(qū)、C區(qū)、X區(qū)；
　　 3.Nest-PCR擴增隱匿性乙肝病毒感染者病毒PreS-S區(qū)，PCR產(chǎn)物直接測序并與標(biāo)準(zhǔn)病毒序列對比分析病毒株變異。
　　 結(jié)果：
　　 1.經(jīng)雅培Architect I2000復(fù)檢健康獻血員中HBsAg陽性率為6.

3、5％(64/983)；擴增病毒S、C、X區(qū)，60.9％(39/64)至少兩個區(qū)擴增陽性；健康獻血員隱匿性HBV感染率為4.0％(39/983)。
　　 2.漏檢的樣本HBsAg滴度定量，中位數(shù)為0.17IU/ml(0.05-1.14 IU/ml)；HBsAg陽性的標(biāo)本60.9％(39/64)病毒擴增陽性，9.1％(25/64)病毒擴增陰性；HBsAg定量：陽性組中位數(shù)為0.15IU/ml(0.05-0.96IU/ml)，陰性組中

4、位數(shù)為0.18IU/ml(0.05-1.14IU/ml)，病毒擴增陽性組與陰性組之間HBsAg定量、性別比例和轉(zhuǎn)氨酶水平均無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 3.隱匿性感染者病毒載量均很低，約50～1000拷貝/ml；病毒PreS-S區(qū)段擴增陽性率35.9％(14/39)；其中60.9％(39/64)至少兩個區(qū)擴增陽性，29.6％(19/64)S區(qū)擴增陽性，64.1％(41/64)C區(qū)擴增陽性，65.6％(42/64)X區(qū)擴增陽性。35.9％

5、(14/39)擴增出病毒PreS-S區(qū)段；
　　 4.測序結(jié)果峰圖均一，未見混合感染。將S基因翻譯成氨基酸后，與GenBank中各種基因型標(biāo)準(zhǔn)株的S區(qū)蛋白對比，并沒有發(fā)現(xiàn)常見的已有文獻證實可導(dǎo)致HBsAg陰性或分泌量降低的“a”決定簇變異。可見少數(shù)可能與HBsAg陰性相關(guān)的S區(qū)氨基酸位點突變：S45D，N68D，Q129R，F(xiàn)134N，V180S， V190I。
　　 結(jié)論：
　　 目前經(jīng)血站常規(guī)檢測HBsAg為